血清CD4+T淋巴細胞相關細胞因子與HBeAg陽性慢性乙型肝炎抗病毒療效相關性的研究.pdf

1、目的:慢性乙型肝炎(CHB)是一種世界性流行性疾病，其發(fā)病率高，由其導致的肝硬化、肝衰竭及原發(fā)性肝癌等給人類健康造成了嚴重危害。HBV感染自然史研究表明，HBV持續(xù)復制是CHB病情進展的獨立危險因素，因此抗病毒治療是CHB治療的關鍵。當前以干擾素（包括聚乙二醇干擾素、普通干擾素等）和核苷（酸）類似物（包括拉米夫定、阿德福韋酯、替比夫定、恩替卡韋等）為主的抗病毒治療方案能夠顯著抑制乙型肝炎病毒(HBV)復制，并在一定程度上緩解病情、延緩疾

2、病進展及降低肝硬化、肝癌等的發(fā)生率。但是，由于受病毒、機體免疫狀態(tài)及肝臟病變程度等多種因素的影響，上述治療方案尚不能有效清除HBV，難以達到臨床治愈的目標。機體免疫是HBV侵入人體后能否被識別、清除的關鍵，也是影響抗病毒療效和臨床預后的重要因素，效應性CD4+T細胞所介導的特異性免疫應答作為機體免疫的重要組成部分，也參與其中。既往研究顯示，HBV特異性CD4+T細胞功能缺陷是導致HBV感染慢性化的原因之一，CD4+T細胞亞群的調(diào)節(jié)功能失

3、衡所導致的免疫功能紊亂也是影響患者在抗病毒治療過程中能否實現(xiàn)良好應答的重要因素，但這些研究集中于細胞水平的檢測，雖然能更準確的反映其細胞頻數(shù)，但檢測方法較為復雜，且成本較高，不適合臨床廣泛推廣應用。CD4+T細胞亞群的分化、功能發(fā)揮及其相互之間的作用是通過復雜的細胞因子網(wǎng)絡實現(xiàn)的，多種細胞因子對CD4+T細胞亞群發(fā)揮免疫功能有重要影響，因此，檢測血清中CD4+T細胞相關細胞因子的水平不僅能在一定程度上反映其功能狀態(tài)，操作方法也更為簡便，

4、且成本較低，易于臨床應用。本研究通過動態(tài)觀察CHB患者在應用不同方案進行抗病毒治療過程中血清CD4+T淋巴細胞相關細胞因子的水平變化，旨在探討血清CD4+T淋巴細胞相關細胞因子水平與HBeAg陽性CHB的抗病毒療效的相關性，以期對指導臨床治療及預測療效提供依據(jù)。
　　方法:研究對象為111例2012年2月至2014年1月期間的河北醫(yī)科大學第三醫(yī)院、石家莊市第五醫(yī)院及邯鄲市第六醫(yī)院門診及住院的HBeAg陽性慢性乙型肝炎患者，其中51

5、例患者應用聚乙二醇干擾素α-2a（派羅欣）180μg或135μg1/周(W)或聚乙二醇干擾素α-2b(佩樂能)1.5μg/kg（體重）1/W，60例患者口服恩替卡韋（潤眾或博路定）0.5mg1/日，共觀察48周。依據(jù)48周時患者HBeAg、HBVDNA分為完全應答(HBVDNA降至不可測、HBeAg轉(zhuǎn)陰)、部分應答（HBVDNA較基線下降≥21gcopies/ml，HBeAg陽性）和無應答（HBVDNA較基線下降＜21gcopies/m

6、l，HBeAg陽性）三個應答組。留取基線(0W)及治療后12W、24W、48W血清標本，并同時檢測患者肝功能、腎功能、HBV血清學標志物和HBV DNA載量;應用雙抗體夾心ELISA檢測血清CD4+T細胞相關細胞因子水平。比較其在治療前后及不同應答組中的水平，并動態(tài)觀察治療過程中的變化趨勢，應用統(tǒng)計學軟件SPSS13.0進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。
　　結果:
　　1患者臨床基線特征及不同治療組的應答情況
　　在PEG-IFNα

7、治療組51例患者中有18例發(fā)生完全應答(CR，35.29％)，CR組基線HBV DNA載量明顯低于無應答（NR）組(P=0.036)。ETV治療組60例患者中有13例(21.67％)實現(xiàn)CR，CR組基線ALT水平明顯高于NR組（P=0.025）。
　　2血清CD4+T淋巴細胞相關細胞因子在PEGIFNα治療前后的變化及與療效的相關性
　　在PEGIFNα治療過程中，不同應答組間及治療前后血清CD4+T細胞相關細胞因子IP10

8、、IL13、IL18和IL21有明顯變化及統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，其他細胞因子未顯示與應答相關的變化(P＞0.05)。
　　基線IP10水平在CR組明顯高于部分應答(PR)組(P=0.048)和NR組(P＜0.001)，治療12W時各組均呈下降趨勢，但CR組下降水平明顯高于PR組和NR組，兩兩比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);
　　各應答組治療前血清IL13水平無明顯差異（P＞0.05），治療12W時CR組和PR組較

9、基線明顯下降(P＜0.05)，NR組則無明顯變化(P=0.291)，對12W時各組IL13下降水平進行比較顯示，CR組和PR組明顯高于NR組(P＜0.05)，PR組與CR組差異不明顯(P=0.10);
　　各應答組血清IL18水平在治療前后各觀察時點均無顯著差異(P＞0.05)，但CR組和PR組24周時較基線均明顯升高(P＜0.001)，NR組則無明顯變化(P＞0.05)，比較24W時各組IL18升高水平顯示，NR組明顯低于CR組

10、(P=0.006)和PR組（P=0.048）;
　　基線各組IL21水平無明顯差異(P＞0.05)，治療12W時CR組和PR組明顯升高(P＜0.001)，CR組升高水平明顯高于PR組(P=0.004)和NR組（P=0.001）。
　　對上述相關細胞因子變化及患者年齡、性別、基線ALT水平、HBVDNA載量進行單因素Logistic回歸分析顯示，患者基線HBVDNA載量＜6.45 lgcopies/ml(P=0.011)、AL

11、T＞179.5U/L(P=0.015)、IP10濃度＞154.245pg/ml(P=0.002)，IP10在治療12W時下降水平＞59.59pg/ml(P＜0.001)，IL13在治療12W時下降水平＞6.11pg/ml(P=0.011)，IL18在治療24W時升高水平＞26.345pg/ml(P=0.015)，IL21在治療12W時升高水平＞102.035pg/ml（P＜0.001）與完全應答相關。多因素Logistic回歸分析顯示僅

12、IL21在治療12W時升高水平＞102.035pg/ml(P=0.045)是治療48周時完全應答的預測因素(PPV81.25％，NPV85.71％，AUC0.823)。
　　3血清CD4+T淋巴細胞相關細胞因子在ETV治療前后的變化及與療效的相關性
　　在ETV治療過程中，不同應答組間及治療前后血清CD4+T細胞相關細胞因子IP10和IL21有明顯變化及統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，其他細胞因子未顯示與應答相關的變化（P＞0.

13、05）。
　　治療前血清IP10水平在CR組明顯高于PR組(P=0.037)和NR組(P=0.014)，PR組和NR組差異不明顯（P=0.249）;治療12W時，CR組和PR組均較基線明顯下降(P＜0.001)，NR組無明顯變化(P=0.157)，各組治療12W時下降水平兩兩比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　各組血清IL21水平在治療前無明顯差異(P＞0.05)，CR組和PR組隨治療的時間延長而呈上升趨勢，至24W

14、時明顯高于基線水平(P＜0.001)，NR組則無明顯變化（P=0.157），各組治療24W時IL21升高水平兩兩比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　對上述相關細胞因子變化及患者年齡、性別、基線ALT水平、HBVDNA載量進行單因素Logistic回歸分析顯示，患者年齡＜38.5歲(P=0.015)，基線ALT＞163.5U/L（P=0.003）、HBVDNA載量＜6.99lgcopies/ml(P=0.081)、IP10濃

15、度＞207.69pg/ml(P=0.041),IP10在治療12W時的下降水平＞71.625pg/ml(P＜0.001)，IL21在治療24W時升高水平＞75.11pg/ml（P=0.003）與完全應答相關。進一步行多因素Logistic回歸分析顯示IP10在治療12W時的下降水平＞71.625pg/ml(P=0.015, PPV55.56％, NPV92.86％, AUC0.809)、IL21在治療24W時的升高水平＞75.11pg/

16、ml(P=0.035，PPV44.44％，NPV96.97％，AUC0.797)、患者年齡＜38.5歲(P=0.047)、基線HBVDNA載量＜6.99lgcopies/ml(P=0.069)是治療48周時完全應答的預測因素。
　　4治療前血清CD4+T細胞相關細胞因子與ALT、HBVDNA的相關性
　　治療前血清IP10(r=0.675，P＜0.001)和IL18（r=0.532，P＜0.001）與ALT呈正相關，IL13

17、與HBV DNA呈正相關(r=0.271，P=0.004)，其它細胞因子未顯示與二者的相關性。
　　結論:
　　1血清CD4+T細胞相關細胞因子IP10、IL13、IL18和IL21與PEGIFNα治療HBeAg陽性CHB的療效存在一定相關性，其中IL21在治療12周時的升高水平是48周時完全應答的預測因素。
　　2血清CD4+T細胞相關細胞因子IP10、IL21與ETV治療HBeAg陽性CHB的療效有一定相關性，其中