P38MAPK和NFκB在體外循環(huán)老年心肌炎性損傷中的作用及其防治的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)首先通過臨床病例回顧性研究發(fā)現(xiàn)，年齡≥70歲、主動脈阻斷時間和體外循環(huán)時間是影響術(shù)后嚴(yán)重并發(fā)癥的主要危險因素，從而在統(tǒng)計(jì)學(xué)分析的科學(xué)角度而不是僅從臨床經(jīng)驗(yàn)角度進(jìn)一步證實(shí)，高齡是影響老年人體外循環(huán)(CardiopulmonaryBypass，CPB)心臟手術(shù)效果的最重要因素之一。著眼于CPB后全身炎癥反應(yīng)綜合征(SystemicInflammatoryResponseSyndrome，SIRS)的發(fā)生發(fā)展，通過隨機(jī)對照臨床實(shí)驗(yàn)研究，

2、探討老年人CPB術(shù)后炎性細(xì)胞因子的動態(tài)變化規(guī)律，發(fā)現(xiàn)70歲以上老年人CPB心臟手術(shù)24小時后炎性損傷明顯比成年患者嚴(yán)重，說明設(shè)法減輕CPB術(shù)后炎性損傷或許對提高老年人心臟手術(shù)療效有更為重要的意義；然后，利用大鼠離體心灌注實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停接慞38MAPK和NFκB在老年心肌炎性損傷中的作用及其與成年心肌的異同，進(jìn)而利用P38MAPK抑制劑SB202190和NFκB抑制劑PDTC從不同層面阻斷SIRS相關(guān)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的活化，觀察SB20219

3、0和PDTC對老年心肌缺血再灌注損傷的影響，探討防治老年人心臟手術(shù)后臟器功能不全的可能途徑。全文分為三部分： 第一部分：老年人體外循環(huán)心肌炎性損傷的實(shí)驗(yàn)研究。 實(shí)驗(yàn)一，70歲以上老年人體外循環(huán)心臟手術(shù)術(shù)后并發(fā)癥臨床分析目的回顧性研究70歲以上老年人體外循環(huán)心臟手術(shù)術(shù)后嚴(yán)重并發(fā)癥的高危因素。方法回顧性分析我院1998.10-2003.10期間實(shí)施的≥70歲體外循環(huán)心臟手術(shù)204例病人的一般情況、合并疾病、術(shù)前術(shù)中術(shù)后情況及

4、病人轉(zhuǎn)歸等臨床資料，探討影響手術(shù)預(yù)后的高危因素。結(jié)果早期死亡13例，死亡率6.4％；術(shù)后出現(xiàn)嚴(yán)重并發(fā)癥(包括早期死亡)40例，發(fā)生率19.6％，與同期70歲以下體外循環(huán)心臟手術(shù)患者比較明顯增高(P＜0.01)；回歸分析發(fā)現(xiàn)年齡≥70歲、主動脈阻斷時間和體外循環(huán)轉(zhuǎn)流時間是影響術(shù)后早期療效的高危因素；急診手術(shù)、合并高血壓、糖尿病、慢性阻塞性肺病和腦血管疾病、冠狀動脈狹窄程度和范圍、術(shù)前心功能是影響手術(shù)預(yù)后的危險因素。結(jié)論70歲以上老年人體外

5、循環(huán)心臟手術(shù)嚴(yán)重并發(fā)癥發(fā)生率高，手術(shù)預(yù)后較差，術(shù)前積極治療合并的慢性疾病、術(shù)中盡量減少主動脈阻斷時間和體外循環(huán)轉(zhuǎn)流時間應(yīng)該可以提高老年人體外循環(huán)心臟手術(shù)的療效。 實(shí)驗(yàn)二，老年患者體外循環(huán)圍手術(shù)期血漿炎性細(xì)胞因子水平的變化目的對比研究70歲以上老年人和3049歲成年人體外循環(huán)CPB心臟手術(shù)術(shù)后炎性損傷的特點(diǎn)。方法隨機(jī)選取我院及第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院心臟外科在2003.10-2004.10期間實(shí)施的≥70歲老年人和30-49歲成年人C

6、PB心臟手術(shù)36(老年人18例，成年人18例)例，記錄病人的臨床資料，并在患者手術(shù)誘導(dǎo)后、CPB結(jié)束后和手術(shù)結(jié)束24小時后分別采集血樣，ELISA法測定TNFα、IL-6、IL-8含量。結(jié)果老年患者早期死亡2例，死亡率11.1％；成年患者無手術(shù)死亡。手術(shù)結(jié)束24小時后老年患者較之成年患者TNFα、IL-6、IL-8含量明顯增高(p＜0.01)，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論70歲以上老年人CPB心臟手術(shù)24小時后炎性損傷明顯比成年患者嚴(yán)重，

7、設(shè)法減輕CPB術(shù)后炎性損傷或許對提高老年人心臟手術(shù)療效有更為重要的意義。 第二部分：P38MAPK和NFκB在老年心肌炎性損傷中的作用。 實(shí)驗(yàn)一，老年心肌與成年心肌的形態(tài)學(xué)研究目的觀察對比老年大鼠和成年大鼠心肌光鏡和電鏡下顯微、超微結(jié)構(gòu)的變化。方法隨機(jī)選用老年和成年SD大鼠各6只，無菌操作采取左室心肌組織，分別用4％多聚甲醛和3％戊二醛固定，送病理科和電鏡室處理，光鏡下觀察HE染色切片顯微結(jié)構(gòu)，透射電鏡下觀察超薄切片超微

8、結(jié)構(gòu)。結(jié)果光鏡下未見老年心肌和成年心肌之間的顯著差別，僅見少數(shù)老年心肌纖維斷裂和/或少量間質(zhì)膠原纖維增生；透射電鏡下超微結(jié)構(gòu)見老年心肌纖維化比較明顯、心肌間質(zhì)之間脂褐素明顯增多，膠原纖維增生明顯，線粒體數(shù)量減少，基質(zhì)內(nèi)致密顆粒明顯增多。結(jié)論老年大鼠心肌組織超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)了較為明顯的病理性老化現(xiàn)象，此形態(tài)學(xué)變化與老年心肌功能下降有關(guān)。 實(shí)驗(yàn)二，P38MAPK和NFκB在老年心肌炎性損傷中的作用研究目的：探討P38MAPK和NFκB在

9、老年心肌炎性損傷中的作用及其與成年心肌的異同。方法：利用大鼠離體心灌注模型，于心臟停跳前及復(fù)灌后工作心穩(wěn)定30min、60min各時間點(diǎn)重復(fù)記錄心排出量(CO)，炎性細(xì)胞因子TNFα、IL-6、IL-8的含量變化及原位分子雜交檢測磷酸化NFκBP65、P38MAPKmRNA在心肌組織的表達(dá)情況。結(jié)果：老年大鼠心臟復(fù)跳后60min時NFκBP65、P38MAPKmRNA表達(dá)量明顯升高，且與該時間點(diǎn)炎性細(xì)胞因子TNFα、IL-6、IL-8水

10、平(p＜0.01)。結(jié)論：老年心肌更易觸發(fā)SIRS，P38MAPK和NFκB通路是參與炎癥反應(yīng)調(diào)控的重要信號系統(tǒng)。通過在信號通路水平阻斷和調(diào)控P38MAPK和NFκB的表達(dá)和活性，或許是防止老年心肌缺血再灌注后炎性損傷的一個有效途徑。 第三部分：SB202190和PDTC對老年心肌缺血再灌注炎性損傷的防治作用。目的：觀察P38MAPK抑制劑SB202190和NFκB抑制劑PDTC對老年心肌缺血再灌注損傷的影響，探討防治老年人心臟

11、手術(shù)后臟器功能不全的可能途徑。方法：利用老年大鼠離體心灌注模型，將動物隨機(jī)分為對照組、SB202190處理組、PDTC處理組和SB202190、PDTC聯(lián)合處理組，于工作心穩(wěn)定60min后記錄CO，炎性細(xì)胞因子TNFα、IL-6、IL-8的含量變化及原位分子雜交檢測磷酸化NFκBP65、P38MAPKmRNA在心肌組織的表達(dá)情況。結(jié)果：SB202190和PDTC在抑制老年心肌缺血再灌注后P38MAPK及NFκB激活的同時，顯著減少炎性細(xì)