番茄SlEIL對乙烯合成的轉(zhuǎn)錄調(diào)控.pdf

1、以模式植物番茄（Solanum lycopersicum Mill.）為試材，研究了果實(shí)成熟衰老相關(guān)變化，采用基因表達(dá)、基因互作等技術(shù)，結(jié)合轉(zhuǎn)基因材料，探索了乙烯信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑轉(zhuǎn)錄因子SlEIL反饋調(diào)控SlACS與SlACO，進(jìn)而調(diào)節(jié)乙烯合成的機(jī)制，主要結(jié)果如下:
　　1、研究了SlACS和SlACO基因的組織特異性。SlACS基因的組織特異性表達(dá)顯示，SlACS2和SlACS4主要在番茄果肉中表達(dá)，SlACS1、SlACS3和Sl

2、ACS8在花中的表達(dá)量較高，SlACS5在莖中表達(dá)最強(qiáng)但在果肉組織中的表達(dá)低于檢測限（果實(shí)成熟進(jìn)程研究不做為研究對象），而SlACS6與SlACS7在不同組織中的表達(dá)量相差不大。SlACO基因在不同組織中廣泛表達(dá)，SlACO1在果實(shí)中的表達(dá)量明顯高于其他組織，SlACO2、SlACO3和SlACO4均在花中表達(dá)最強(qiáng)，SlACO5則在葉片中表達(dá)最高，而SlACO6除在莖中表達(dá)量較低以外，其余三種組織相差不大。
　　2、開展了SlEI

3、L、SlACS和SlACO基因在番茄果實(shí)不同成熟階段的表達(dá)模式研究。對4個(gè)不同成熟期果實(shí)，即綠熟(MG)，破白(BR)，粉紅(PK)，紅熟（RR）的研究表明，伴隨著成熟，果實(shí)色澤指數(shù)和乙烯釋放量增加、硬度下降。SlACS基因家族各成員表達(dá)模式不盡相同，其中SlACS2和SlACS4表達(dá)隨果實(shí)成熟顯著上升，SlACS1、SlACS3、SlACS6和SlACS7的表達(dá)則相對穩(wěn)定，SlACS8至PK期表達(dá)量有所上升。SlACO基因家族各成員表

4、達(dá)結(jié)果表明，SlACO1、SlACO2和SlACO3表達(dá)隨果實(shí)成熟趨于上升，SlACO5則僅在紅熟果實(shí)中略有增強(qiáng)表達(dá)，SlACO6的表達(dá)呈BR期上升至RR下降的趨勢，而SlACO4則為組成型表達(dá)。4個(gè)SlEIL基因表達(dá)相對較穩(wěn)定，其中SlEIL1在BR期表達(dá)略有上升，SlEIL4伴隨著果實(shí)成熟略微上升。
　　3、研究了轉(zhuǎn)反義SlEIL1基因番茄材料(1AS-2)乙烯釋放量。利用外源乙烯(100μl/L，18h)處理播種后3周轉(zhuǎn)基因

5、實(shí)生苗顯示，轉(zhuǎn)基因1AS-2實(shí)生苗的乙烯釋放量明顯低于野生型的。進(jìn)而分析比較了轉(zhuǎn)基因和野生型番茄果實(shí)乙烯釋放速率，發(fā)現(xiàn)BR和BR+7的轉(zhuǎn)基因和野生型番茄果實(shí)的乙烯釋放速率均無顯著差異。上述結(jié)果表明抑制SlEIL可導(dǎo)致轉(zhuǎn)基因1AS-2實(shí)生苗乙烯釋放受抑制，而在BR和BR+7果實(shí)中未發(fā)現(xiàn)此現(xiàn)象，需進(jìn)一步探明其原因。利用轉(zhuǎn)基因和野生型實(shí)生苗，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因?qū)嵣缰?個(gè)SlEIL的表達(dá)都受到不同程度的抑制，同時(shí)SlACS1、SlACS3、SlACO

6、3、SlACO4和SlACO6的表達(dá)在1AS-2轉(zhuǎn)基因番茄的實(shí)生苗中受到抑制，這與乙烯釋放速率一致。SlACS7和SlACS8在轉(zhuǎn)基因?qū)嵣缰斜磉_(dá)量甚至高于野生型，其余家族成員則無顯著差異。推測SlEIL受抑制的轉(zhuǎn)基因?qū)嵣缰幸蚁┽尫潘俾实南陆悼赡芘cSlACS1、SlACS3、SlACO3、SlACO4和SlACO6相關(guān)。
　　4、研究了SlEIL對SlACS和SlACO基因啟動(dòng)子的調(diào)控效應(yīng)。利用分離得到的SlACS1、SlACS