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1、目的:初步探討聚磷酸鈣纖維/磷酸鈣骨水泥復(fù)合材料對(duì)體外人成骨細(xì)胞OPG/RANKL系統(tǒng)的影響,為其臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。
方法:1.將CPPF及CPC按質(zhì)量比1∶9均勻混合,按固液比3∶1加入固化液,使之呈均勻稠厚糊狀,將其倒入自制的直徑3.0cm,厚度3mm的圓柱形模具中,凝固后消毒備用。
2.培養(yǎng)人成骨細(xì)胞樣細(xì)胞系MG63,調(diào)整細(xì)胞濃度為1x105,并接種至含自制CPPF/CPC復(fù)合材料模塊的細(xì)胞培養(yǎng)板(骨水泥組
2、)中和普通六孔培養(yǎng)板(正常組)中,采用計(jì)數(shù)法測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)0h、6h、12h、24h、36h、48h的細(xì)胞數(shù)量。
3.應(yīng)用RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)36h時(shí)兩組OPG和RANKL的mRNA表達(dá)量。
4.應(yīng)用Western blot檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)36h時(shí)兩組OPG和RANKL的蛋白表達(dá)量及其比值。
結(jié)果:1.骨水泥組于6h、12h、24h細(xì)胞數(shù)量明顯低于正常組,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),而于36h、48h的細(xì)
3、胞數(shù)量與正常組比較,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)。
2.骨水泥組細(xì)胞培養(yǎng)36h時(shí)OPG與RANKL在mRNA水平的表達(dá)量均較正常組明顯增高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05)。
3.骨水泥組細(xì)胞培養(yǎng)36h時(shí)OPG與RANKL在蛋白水平的表達(dá)量均較正常組明顯增高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05),然而OPG/RANKL比值較正常組明顯降低,且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05)。
結(jié)論:1.按1:9混合的CPPF/CPC復(fù)合
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