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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
觀察慢性低氧高二氧化碳模型小鼠海馬區(qū)小膠質(zhì)細(xì)胞IBA-1的表達(dá)變化;觀察米諾環(huán)素對(duì)慢性低氧高二氧化碳模型小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞活化的影響。
方法:
將清潔級(jí)雄性C57BL/6野生小鼠30只,體重23~26g,隨機(jī)分為三組:空白對(duì)照組(NC),鹽水造模組(SM),米諾環(huán)素造模組(MM),每組各10只。將造模組小鼠置于常壓低氧高二氧化碳艙內(nèi),通入氮?dú)庹{(diào)節(jié)艙內(nèi)氧濃度,使其維持在9%~11%,通入二氧化碳使其濃度維
2、持在5%~6%,每天8h,共4周。兩周后每天造模結(jié)束MM組立即腹腔注射米諾環(huán)素(45mg/kg)、SM組以等量的生理鹽水腹腔注射。其余時(shí)間與空白對(duì)照組置于同一室內(nèi)。小鼠飼養(yǎng)到規(guī)定時(shí)間后,用10%水合氯醛腹腔注射麻醉,處死小鼠后取心肌,分離并分別稱取右心室游離壁(RV)和左心室加室間隔(LV+S)的重量,以RV/(LV+S)的重量比,作為右室肥大的指標(biāo);快速分離出兩側(cè)海馬,右側(cè)用于免疫組化檢測(cè)小膠質(zhì)細(xì)胞的活化,左側(cè)用于熒光定量PCR測(cè)定I
3、BA-1mRNA、MMP-9mRNA的表達(dá)。
結(jié)果:
1.右心室肥厚指數(shù)RV/(LV+S)
SM組、MM組的RV/(LV+S)均高于NC組(P<0.05),SM組小鼠RV/(LV+S)(0.2666±0.02)較NC組小鼠(0.2164±0.02)的比值明顯增高(P<0.05);MM組小鼠(0.2780±0.03)較NC組小鼠RV/(LV+S)明顯增高(P<0.05),而SM組和MM組比較無(wú)明顯差異(P>0
4、.05)。
2.小膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)變化
NC組海馬區(qū)可見(jiàn)靜息態(tài),呈樹(shù)枝狀、胞體小、突起多的小膠質(zhì)細(xì)胞,SM組可見(jiàn)胞體肥大,突起較少的小膠質(zhì)細(xì)胞,MM組有散在的小膠質(zhì)細(xì)胞激活。
3.熒光定量PCR檢測(cè)IBA-1mRNA、MMP-9mRNA的表達(dá)與NC組相比,SM組IBA-1 mRNA、MMP-9 mRNA表達(dá)上調(diào);與SM組相比,MM組IBA-1 mRNA、MMP-9 mRNA表達(dá)減少。
結(jié)論:
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