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1、本論文主要運(yùn)用微生物學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)、營(yíng)養(yǎng)學(xué)和生態(tài)學(xué)等研究方法,研究了芽孢桿菌和中草藥在凡納濱對(duì)蝦飼料中的應(yīng)用,主要結(jié)果如下: 1.研究了不同濃度中草藥制劑對(duì)地衣芽孢桿菌生長(zhǎng)繁殖的影響。結(jié)果表明適當(dāng)?shù)闹胁菟帩舛饶軌虼龠M(jìn)地衣芽孢桿菌的生長(zhǎng)繁殖,兩者在飼料中共同添加使用是可能的。 2.本實(shí)驗(yàn)分成生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)和消化酶活性實(shí)驗(yàn)兩部分,研究了飼料中單獨(dú)或共同添加芽孢桿菌和中草藥制劑對(duì)凡納濱對(duì)蝦存活、生長(zhǎng)、消化酶活性及體成分的影響。實(shí)
2、驗(yàn)分成5個(gè)處理,分別投喂5種不同的飼料:基礎(chǔ)飼料,中草藥飼料f在基礎(chǔ)飼料中添加0.20%中草藥制劑,M),芽孢桿菌飼料(在基礎(chǔ)飼料中添加0.30%芽孢桿菌制劑,B),中草藥和芽孢桿菌飼料1(在基礎(chǔ)飼料中添加0.20%中草藥制劑和0.30%芽孢桿菌制劑,BMl),中草藥和芽孢桿菌飼料2(在基礎(chǔ)飼料中添加0.10%中草藥制劑和0.15%芽孢桿菌制劑,BM2)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果,芽孢桿菌和中草藥能夠提高對(duì)蝦的增重率,M、BM1、BM2組與對(duì)照組差異顯
3、著(P<0.05),B、BM1、M組之間差異不顯著。BM2組特定生長(zhǎng)率最高,BM1組次之,均與對(duì)照組差異顯著(P<0.05)。對(duì)蝦常規(guī)體成分除粗脂肪外,無(wú)顯著性差異。BM1組脂肪含量最低,而B(niǎo)M2組最高。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,每隔2周取樣一次分析凡納濱對(duì)蝦肝胰臟的蛋白酶和淀粉酶活性,結(jié)果發(fā)現(xiàn)單獨(dú)或共同添加芽孢桿菌和中草藥制劑可以在一定程度上提高消化酶的活性。在第2周和第6周的取樣中,BM2組的蛋白酶和淀粉酶均顯著高于對(duì)照組(P<0.05);在第
4、8周的取樣中,B組的淀粉酶活性顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,在基礎(chǔ)飼料中添加0.10%中草藥制劑和0.15%芽孢桿菌制劑使用效果最好。 3.本實(shí)驗(yàn)研究了飼料中單獨(dú)或共同添加中草藥和芽孢桿菌對(duì)凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeus vannamei)生長(zhǎng)和腸道細(xì)菌的影響。以基礎(chǔ)飼料為對(duì)照組(C),通過(guò)添加中草藥和芽孢桿菌配制成4種實(shí)驗(yàn)飼料:0.2%中草藥(M),0.20%中草藥制劑+0.30%芽孢桿菌(BMl),0
5、.10%中草藥制劑+0.15%芽孢桿菌(BM2),0.30%芽孢桿菌(B)。實(shí)驗(yàn)共進(jìn)行了56d,各組對(duì)蝦的成活率都很高(95.83~98.33%),各處理間無(wú)顯著差異(P>0.05)。投喂實(shí)驗(yàn)飼料的各組對(duì)蝦終末體重均高于對(duì)照組(C),其中BM2與C差異性顯著(P<0.05)。M、BMl和BM2的增重率和特定增長(zhǎng)率顯著高于C和B。M組的對(duì)蝦腸道異養(yǎng)菌總數(shù)和弧菌數(shù)均高于其它各組,而共同添加組BMl和BM2的異養(yǎng)菌和弧菌數(shù)則最少。從各組隨機(jī)挑
6、取30株細(xì)菌進(jìn)行分類鑒定,結(jié)果C、M、BM1、BM2和B組細(xì)菌屬數(shù)分別為11、8、6、5和7個(gè)。飼料中添加中草藥和芽孢桿菌促進(jìn)了對(duì)蝦的生長(zhǎng),且共同添加的效果好于單獨(dú)添加,它們的使用改變了腸道細(xì)菌的數(shù)量和組成。 4.本實(shí)驗(yàn)研究了飼料中添加不同水平的芽孢桿菌和中草藥制劑對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)、存活、體成分、消化酶活性以及血清生化指標(biāo)的影響。以基礎(chǔ)飼料為對(duì)照(Diet0),通過(guò)添加中草藥和芽孢桿菌配制成6種實(shí)驗(yàn)飼料:0.10%中草藥+0.1
7、0%芽孢桿菌(Diet11),0.10%中草藥+0.20%芽孢桿菌(Diet12),0.10%中草藥+0.30%芽孢桿菌(Diet13),0.20%中草藥+0.10%芽孢桿菌(Diet21),0.20%中草藥+0.20%芽孢桿菌(Diet22),0.20%中草藥+0.30跖芽孢桿菌(Diet23)。實(shí)驗(yàn)共進(jìn)行56d,各組對(duì)蝦的成活率76.19~84.76%,各處理間無(wú)顯著差異(P>0.05)。對(duì)蝦的終末體重、特定生長(zhǎng)率(SGR)、蛋白質(zhì)
8、效率(PER)和蛋白質(zhì)累積率(PPV)隨中草藥和芽孢桿菌濃度的增加而增加,餌料系數(shù)(FCR)隨添加濃度增加有所降低。芽孢桿菌和中草藥交互作用對(duì)終末體重和SGR影響顯著,Diet23組的終末體重和SGR均與對(duì)照組差異顯著(P<0.05)。添加中草藥和芽孢桿菌對(duì)蝦體的水分、粗蛋白、灰分等指標(biāo)影響不大(P>0.05),對(duì)粗脂肪含量產(chǎn)生顯著影響(P<0.05),Diet23組對(duì)蝦的粗脂肪含量最高,顯著高于Diet0、Diet13和Diet22組
9、。添加中草藥和芽孢桿菌提高了對(duì)蝦腸的淀粉酶和蛋白酶以及肝胰臟的蛋白酶(P<0.05),對(duì)肝胰臟的淀粉酶活性作甩不明顯(P>0.05)。此外,中草藥和芽孢桿菌交互作用顯著影響了對(duì)蝦肝胰臟的堿性磷酸酶和酸性磷酸酶的活性(P<0.05)。血清中的蛋白和葡萄糖含量隨中草藥和芽孢桿菌添加量的增加而增加,低濃度的中草藥(Diet11、Diet12和Diet13組)可提高甘油三酯含量,高濃度的芽孢桿菌提高了蝦血清中膽固醇含量高(P<0.05)。
10、 5.本實(shí)驗(yàn)研究了飼料中添加芽孢桿菌和中草藥制劑對(duì)凡納濱對(duì)蝦免疫功能的影響。以基礎(chǔ)飼料為對(duì)照(Diet0),通過(guò)添加中草藥和芽孢桿菌配制成6種實(shí)驗(yàn)飼料:0.10%中草藥+0.10%芽孢桿菌(Diet11),0.10%中草藥+0.20%芽孢桿菌(Dietl2),0.10%中草藥+0.30%芽孢桿菌(Dietl3),0.20%中草藥+0.10%芽孢桿菌(Diet21),0.20%中草藥+0.20%芽孢桿菌(Diet22),0.20%中草藥
11、+0.30%芽孢桿菌(Diet23)。實(shí)驗(yàn)共進(jìn)行了56d,對(duì)血細(xì)胞數(shù)目、酚氧化酶活力(PO)、溶菌酶活力、超氧化物歧化酶(T-SOD)活力以及總抗氧化能力進(jìn)行了測(cè)定。芽孢桿菌對(duì)血細(xì)胞數(shù)目產(chǎn)生顯著影響,Diet12,Diet13和Diet23組對(duì)蝦的血細(xì)胞數(shù)顯著高于其余各組(P<0.05)。中草藥以及交互作用對(duì)血清PO產(chǎn)生顯著影響(P<0.05),高濃度的中草藥可以提高血清PO。大多數(shù)實(shí)驗(yàn)組對(duì)蝦溶菌酶活力高于對(duì)照組。中草藥、芽孢桿菌以及它
12、們的交互作用對(duì)T-SOD未產(chǎn)生顯著影響(P>0.05)。Diet23組對(duì)蝦血清的總抗氧化能力最高,除Diet21組外,與其余各組差異顯著(P<0.05)。 6.研究了中草藥和芽孢桿菌共同添加到不同營(yíng)養(yǎng)水平的飼料中,對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)、消化酶活性、體成分組成以及血清生化指標(biāo)的影響。基礎(chǔ)飼料1為魚(yú)粉含量29%的高檔飼料,基礎(chǔ)飼料2是以豆粕和花生粕替代部分魚(yú)粉的低檔料。通過(guò)在兩種飼料中添加芽孢桿菌和中草藥制劑作為實(shí)驗(yàn)用料:基礎(chǔ)飼料1(D
13、iet10),基礎(chǔ)飼料1+0.10%中草藥+0.15%芽孢桿菌(Diet11),基礎(chǔ)飼料1+0.20%中草藥+0.30%芽孢桿菌(Diet12),基礎(chǔ)飼料2(Diet20),基礎(chǔ)飼料2+0.10%中草藥+0.15%芽孢桿菌(Diet21),基礎(chǔ)飼料2+0.20%中草藥+0.30%芽孢桿菌(Diet22)。實(shí)驗(yàn)共進(jìn)行56d,基礎(chǔ)飼料2各組對(duì)蝦成活率高于基礎(chǔ)飼料1。數(shù)據(jù)分析顯示,不同水平的飼料及添加劑均對(duì)終末體重、特定生長(zhǎng)率(SGR)、餌料
14、系數(shù)(FCR)和蛋白質(zhì)效率(PER)產(chǎn)生了顯著影響。攝食基礎(chǔ)飼料1的各組對(duì)蝦終末體重和特定增長(zhǎng)率均顯著高于攝食基礎(chǔ)飼料2的各組對(duì)蝦。對(duì)于同一種基礎(chǔ)飼料,添加芽孢桿菌和中草藥制劑可以提高蛋白質(zhì)效率(PER)和蛋白質(zhì)累積率(PPV),降低餌料系數(shù)(FCR)。飼料和添加劑對(duì)蝦體的常規(guī)成分有一定的影響。中草藥和芽孢桿菌能夠提高對(duì)蝦腸道和肝胰臟消化酶活性以及肝胰臟堿性磷酸酶活性?;A(chǔ)飼料1各組的堿性磷酸酶和酸性磷酸酶顯著低于基礎(chǔ)飼料2各組?;A(chǔ)飼
15、料1組的對(duì)蝦血清葡萄糖高于基礎(chǔ)飼料2組對(duì)蝦,但是膽固醇含量低于基礎(chǔ)飼料2組對(duì)蝦。添加劑能夠提高對(duì)蝦的血清葡萄糖和蛋白質(zhì)含量。 7.研究了在不同飼料中添加芽孢桿菌和中草藥制劑對(duì)凡納濱對(duì)蝦免疫功能的影響。實(shí)驗(yàn)以兩種商用飼料原料為基礎(chǔ)飼料,基礎(chǔ)飼料1為魚(yú)粉含量29%的高檔飼料,基礎(chǔ)飼料2是以豆粕和花生粕替代部分魚(yú)粉的低檔料。通過(guò)在基礎(chǔ)飼料中添加不同量的芽孢桿菌和中草藥制劑作為實(shí)驗(yàn)用料:基礎(chǔ)飼料1(=Diet10),基礎(chǔ)飼料1+0.10
16、%中草藥+0.15%芽孢桿菌(Diet11),基礎(chǔ)飼料1+0.20%中草藥+0.30%芽孢桿菌(Dietl2),基礎(chǔ)飼料2(Diet20),基礎(chǔ)飼料2+0.10%中草藥+0.15%芽孢桿菌(Diet21),基礎(chǔ)飼料2+0.20%中草藥+0.30%芽孢桿菌(Diet22)。實(shí)驗(yàn)共進(jìn)行了56d,對(duì)血細(xì)胞數(shù)目、酚氧化酶活力(PO)、溶菌酶活力、超氧化物歧化酶(T-SOD)活力以及總抗氧化能力進(jìn)行了測(cè)定。飼料和添加劑對(duì)血細(xì)胞數(shù)目、溶菌酶活力產(chǎn)生
17、顯著影響,添加劑以及飼料和添加劑的交互作用對(duì)血清總抗氧化能力產(chǎn)生顯著影響(P<0.05)??傮w來(lái)講,在不同飼料中添加中草藥和芽孢桿菌對(duì)血細(xì)胞數(shù)目、溶菌酶活力、酚氧化酶活力(PO)、總抗氧化能力和超氧化物歧化酶(T-SOD)活力均有不同程度的提高。通過(guò)添加芽孢桿菌和中草藥制劑可以顯著提高基礎(chǔ)飼料1的血細(xì)胞數(shù)目和總抗氧化能力以及基礎(chǔ)飼料2的血細(xì)胞數(shù)目和溶菌酶活力。不同營(yíng)養(yǎng)水平的飼料對(duì)免疫指標(biāo)也有一定的影響,Diet20組的總抗氧化能力顯著高
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