從睡眠時(shí)相和相關(guān)遞質(zhì)水平探討加味逍遙散調(diào)治心理應(yīng)激性失眠的機(jī)制.pdf

1、目的：在反復(fù)制動(dòng)建立心理應(yīng)激大鼠模型工作的基礎(chǔ)上，參考睡眠學(xué)指標(biāo)和神經(jīng)遞質(zhì)指標(biāo)，進(jìn)一步評(píng)定心理應(yīng)激失眠大鼠動(dòng)物模型可行性。在此基礎(chǔ)上，評(píng)價(jià)加味逍遙散調(diào)治應(yīng)激性失眠的療效，并初步探討其作用機(jī)制，為臨床治療提供理論依據(jù)。 方法：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇健康清潔級(jí)同種系Wistar大鼠50只，雄性，體重200-250g，鼠齡8周。根據(jù)體重，隨機(jī)分為對(duì)照組(COntrol Group，C)、模型組(Model，M)、中藥組(Herb Group，H

2、)、西藥組(Western Group，W)及中西藥結(jié)合組(IntegratedGroup，Ⅰ)五組，每組10只。各組動(dòng)物均進(jìn)行手術(shù)安裝電極，用以記錄腦電、肌電活動(dòng)，術(shù)后休息一周的動(dòng)物采用限制性制動(dòng)的方法造模，各藥物組分別灌胃給予中藥加味逍遙散、西藥舒樂(lè)安定以及中西藥加味逍遙散及舒樂(lè)安定各一半，每天制動(dòng)給藥，在第1、3、5、7、10、15天制動(dòng)后進(jìn)行睡眠監(jiān)測(cè)。第15天取材，將以上五組動(dòng)物分別用于組織學(xué)檢測(cè)，觀察各組中縫核、海馬區(qū)域P物質(zhì)

3、(SP)免疫組織化學(xué)改變；同時(shí)利用透射電鏡觀察對(duì)照組、模型組、中藥組以上區(qū)域的超微結(jié)構(gòu)；另外，利用高效液相法檢測(cè)這三組血清、中縫核 5-羥色胺(5-HT)的含量及血清、下丘腦去甲腎上腺素(NE)的含量。 結(jié)果： 1大鼠睡眠時(shí)相：1.1與對(duì)照組比較，限制性制動(dòng)模型組大鼠第1、3、5、7、10、15天覺(jué)醒(W)時(shí)間分別增加，非快眼動(dòng)睡眠(NREMs)和快眼動(dòng)睡眠(REMs)時(shí)間分別減少。1.2與限制性制動(dòng)模型組比較，西藥治療組

4、大鼠第1，3，5天W時(shí)間分別減少，第7，10，15天W時(shí)間分別增加；中藥治療組大鼠第1天W時(shí)間增加；第3，5，7，10，15天W時(shí)間分別減少；中西藥結(jié)合治療組大鼠第1，3，5，7，10，15天W時(shí)間分別減少。1.3與模型組比較，西藥治療組大鼠第1，3，5，7天NREMs時(shí)間分別增加，第10，15天NREMs時(shí)間分別減少；中藥治療組大鼠第1天NREMs時(shí)間分別減少，第3，5，7，10，15天NREMs時(shí)間分別增加；中西藥治療組大鼠第1，3

5、，5，7，10，15天NREMs時(shí)間分別增加。1.4與模型組比較，西藥治療組第1，5，7，10，15天REMs時(shí)間分別增加，第3天REMs時(shí)間減少；中藥治療組第1，5，7，10天REMs時(shí)間分別增加，第3，15天REMs時(shí)間分別減少：中西藥治療組第1，3，5天REMs時(shí)間分別減少，第7，10，15天REMs時(shí)間分別增加；1.5模型組大鼠造模后覺(jué)醒次數(shù)增多；中藥加味逍遙散調(diào)治后覺(jué)醒次數(shù)減少。1.6模型組大鼠第1，3，5，7，10，15天N

6、REMs 6波分別減少；與模型組相比，中藥加味逍遙散調(diào)治后第1，3，5，7，10，15天NREMsδ波分別增加。 2 組織學(xué)鑒定：2.1電鏡下可見(jiàn)心理應(yīng)激性失眠大鼠中縫核以及海馬神經(jīng)元細(xì)胞核染色質(zhì)濃縮并邊集；粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張、排列紊亂和脫顆粒；線粒體腫脹，部分空泡樣變性；高爾基復(fù)合體腫脹和極性消失；髓鞘板層排列疏松、間隙加大，內(nèi)部軸突神經(jīng)絲松解、彎曲：突觸結(jié)構(gòu)分界不清，突觸小泡稀疏。中藥組與對(duì)照組比較無(wú)明顯病變。2.2正常對(duì)照組S

7、p主要分布于神經(jīng)元細(xì)胞的胞體，胞核胞質(zhì)均有表達(dá)，呈棕色顆粒狀。心理應(yīng)激模型組SP陽(yáng)性神經(jīng)元數(shù)目明顯減少，染色變淺。中藥加味逍遙散或中西藥結(jié)合治療后SP陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)增多。 3 神經(jīng)遞質(zhì)含量：3.1血清和中縫核5-HT含量變化：與正常組相比，模型組血清5-HT輕度下降，中縫核5-HT明顯下降。與模型組相比，中藥調(diào)治后血清5-HT輕度升高，中縫核5-HT明顯升高。3.2血清和下丘腦NE含量變化：與正常組相比，模型組血清和下丘腦NE含量

8、升高，經(jīng)加味逍遙散調(diào)治后，血清和下丘腦NE含量明顯下降。 結(jié)論： 1利用限制性制動(dòng)方法建立大鼠心理應(yīng)激性失眠模型是可行的。 2 限制性制動(dòng)模型可以引起大鼠中縫核、海馬超微結(jié)構(gòu)改變以及中樞神經(jīng)遞質(zhì)含量發(fā)生變化。 3 中藥加味逍遙散或者中西藥合劑調(diào)治心理應(yīng)激性失眠的療效較明確穩(wěn)定，可以減少覺(jué)醒時(shí)間，增加NREMs。同時(shí)使受損害的海馬、中縫核得到部分修復(fù)，神經(jīng)遞質(zhì)的含量也基本恢復(fù)正常。 4 中藥加味逍遙散