壓瘡?fù)砥诼噪y愈合創(chuàng)面分子機(jī)制的探討.pdf

1、壓瘡(PU)是臨床常見(jiàn)的嚴(yán)重并發(fā)癥，好發(fā)于長(zhǎng)期臥床、坐輪椅、年老體弱、脊髓損傷、腦血管疾病和活動(dòng)受限等患者。近年來(lái)，在臨床和社區(qū)工作中，由于患者內(nèi)部和外部因素以及照顧者對(duì)壓瘡的認(rèn)知不足等多方面的影響，難免性壓瘡的發(fā)生不可避免，若進(jìn)一步發(fā)展為深度壓瘡則形成慢性難愈合創(chuàng)面。慢性創(chuàng)面的治療一直是困擾臨床醫(yī)護(hù)工作者的重點(diǎn)和難點(diǎn)，因此探討壓瘡慢性難愈合創(chuàng)面的分子機(jī)制，可以為臨床壓瘡的防治提供新的科學(xué)思路。
　　 目的:通過(guò)研究炎癥因子IL

2、-1β、TNF-a、膠原纖維、生長(zhǎng)因子VEGF、bFGF及其受體KDR、FGFR1和細(xì)胞凋亡因子Caspase-3在Ⅲ、Ⅳ期壓瘡慢性難愈合創(chuàng)面中的分布規(guī)律及表達(dá)特征，探討他們與壓瘡形成的相關(guān)性，深入了解壓瘡的分子機(jī)制，為晚期壓瘡的臨床治療提供理論依據(jù)和新的思路。
　　 方法:收集臨床Ⅲ、Ⅳ期壓瘡患者共21例共23處創(chuàng)面，包括壓瘡邊緣組織和壓瘡中心組織，急性外傷患者14例，正常皮膚6例，將以上創(chuàng)面組織分為四組:壓瘡中心組、壓瘡邊緣

3、組、急性創(chuàng)面組、正常皮膚組。通過(guò)HE染色觀察不同創(chuàng)面組織的形態(tài)學(xué)特征;膠原染色法分析不同創(chuàng)面組織中膠原分布及表達(dá)的特點(diǎn);免疫組織化學(xué)法檢測(cè)組織中VEGF、bFGF、Caspase-3的分布規(guī)律;熒光定量PCR法定量分析IL-1β、TNF-a、生長(zhǎng)因子VEGF、bFGF及其受體KDR、FGFR1基因水平的變化特征。
　　 結(jié)果:
　　 1、通過(guò)HE染色見(jiàn)壓瘡邊緣組織和中心組織中大量炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)，急性創(chuàng)面中有少量炎性細(xì)胞分

4、布，而正常皮膚組織分布規(guī)律整齊。通過(guò)熒光定量Q-RT-PCR法定量分析炎癥因子IL-1β，TNF-a在不同創(chuàng)面組織的表達(dá)規(guī)律，結(jié)果表明壓瘡邊緣組織中表達(dá)量最高，壓瘡邊緣組和壓瘡中心組中的表達(dá)量均高于急性創(chuàng)面組，正常皮膚組織中表達(dá)較低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2、通過(guò)Masson染色方法對(duì)不同創(chuàng)面進(jìn)行膠原染色，可見(jiàn)膠原纖維在壓瘡邊緣組織和中心組織中的表達(dá)較少甚至消失，急性創(chuàng)面中有部分表達(dá)，而正常皮膚組織中有大量的膠原纖維的分布。

5、
　　 3、通過(guò)免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)壓瘡組織中生長(zhǎng)因子VEGF、bFGF陽(yáng)性顆粒主要分布在成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞中。在壓瘡中心組中的表達(dá)量分別為100.24±39.16、131.55±45.61;在壓瘡邊緣組織中表達(dá)量表達(dá)分別為228.71±48.33、298.83±79.88;壓瘡中心組與壓瘡邊緣組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P值均小于0.01。在急性創(chuàng)面中VEGF、bFGF陽(yáng)性顆粒主要表達(dá)于成纖維細(xì)胞中，其表達(dá)量分別為292.

6、26±59.2、443.31±193.73;急性創(chuàng)面組與壓瘡創(chuàng)面組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05或P＜0.01。正常皮膚組VEGF、bFGF表達(dá)較少，分別為45.18±18.47、54.11±22.34，與兩個(gè)壓瘡組和急性創(chuàng)面組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P值均小于0.01。通過(guò)熒光定量PCR方法在基因水平上對(duì)VEGF、bFGF及其他們的受體KDR、FGFR1在不同創(chuàng)面中的表達(dá)規(guī)律進(jìn)行研究，結(jié)果顯示VEGF、bFGF基因表達(dá)水平同蛋白

7、表達(dá)一致，而受體的基因表達(dá)有所不同于生長(zhǎng)因子，KDR、FGFR1在急性創(chuàng)面中表達(dá)最高顯著高于壓瘡組，而正常組高于壓瘡中，即由高至低依次為急性創(chuàng)面組、正常皮膚組、壓瘡邊緣組、壓瘡中心組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 4、通過(guò)免疫組織化學(xué)法檢測(cè)壓瘡中凋亡因子Caspase-3陽(yáng)性顆粒主要分布在成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞。在急性創(chuàng)面中的陽(yáng)性顆粒主要表達(dá)于成纖維細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞中，正常皮膚中陽(yáng)性顆粒表達(dá)極少。通過(guò)積分光密度半定量分析，Cas

8、pase-3在壓瘡中心組織中的表達(dá)量最高，其余依次為壓瘡邊緣組織、急性創(chuàng)面組織和正常皮膚組織。
　　 結(jié)論：
　　 1、壓瘡創(chuàng)面中炎癥反應(yīng)的過(guò)度和過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的表達(dá)，有可能阻礙了創(chuàng)面的愈合，此外膠原纖維表達(dá)減少或消失也是影響愈合的重要因素。
　　 2、生長(zhǎng)因子及其受體在壓瘡中的表達(dá)顯著低于急性創(chuàng)面組織，不能達(dá)到正常愈合的所需量，可能是創(chuàng)面難愈合的重要原因。
　　 3、壓瘡創(chuàng)面中存在著細(xì)胞過(guò)度凋亡的現(xiàn)象，有可能