黃芪對(duì)小鼠胰島炎及胰島β細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用.pdf

1、黃芪對(duì)小鼠胰島炎及胰島B細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用中文摘要目的探討黃芪在體內(nèi)對(duì)胰島B細(xì)胞的保護(hù)作用。方法4—5周齡雄性健康昆明小鼠56只(SPF清潔級(jí))，體質(zhì)量189229，隨機(jī)分為4組：對(duì)照組、糖尿病對(duì)照組、黃芪小劑量STZ組和黃芪大劑量STZ組(以下分別簡(jiǎn)稱為小劑量組和大劑量組)，每組14只(n=14)。所有小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，小劑量和大劑量組分別以黃芪生藥159／(kgd)、309／(kgd)連續(xù)腹腔注射10天，對(duì)照組和糖尿病對(duì)照組腹腔

2、注射同體積的生理鹽水。之后糖尿病對(duì)照組，小劑量組和大劑量組均給予STZ40mg／(kgd)連續(xù)腹腔注射5天，誘導(dǎo)TIDM模型，對(duì)照組腹腔注射同體積檸檬酸鹽緩沖液。STZ腹腔注射后第3天、第7天及之后每周同一時(shí)間鼠尾靜脈采血測(cè)空腹血糖，高于167mmol／L可認(rèn)為糖尿病早期成模。觀察3周，摘取眼球取血lml，3000r／min離blO分鐘，留取血清，硝酸還原酶法測(cè)血清中一氧化氮(NO)含量；化學(xué)比色法測(cè)血清中誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)

3、活性；ELSIA法測(cè)血清胰島素水平。分離胰腺置10％中性福爾馬林固定，常規(guī)制作石蠟切片，HE染色制備病理切片觀察胰島炎積分；末端脫氧核苷?；D(zhuǎn)移酶介導(dǎo)dUTP切口末端標(biāo)記(terminaldexynucleotidytransferase(TdT)一mediateddUTPnickendlabeling，TUNEL)法觀察胰島細(xì)胞凋亡，監(jiān)測(cè)胰島細(xì)胞凋亡率。結(jié)果黃芪可延緩糖尿病發(fā)生，降低糖尿病發(fā)病率，降低iNOS活性和N0水平，同時(shí)降低胰

4、島炎積分和胰島B細(xì)胞凋亡率，大劑量組效果更為顯著。結(jié)論在體內(nèi)黃芪對(duì)胰島B細(xì)胞具有保護(hù)作用，與降氐iNOS活性、減少NO生成，抑制胰島0細(xì)胞凋亡有關(guān)；改善機(jī)體清除自由基能力，可有效預(yù)防和延緩糖尿病的發(fā)生。碩士研究生：郝萌萌(dJg內(nèi)科)指導(dǎo)老師：陳志紅副教授關(guān)鍵詞：黃芪；胰島f3細(xì)胞；一氧化氮；糖尿?。坏蛲?目錄引言6第1章材料和方法811儀器、試劑、耗材8111主要儀器8112主要試劑及耗材8113實(shí)驗(yàn)動(dòng)物8114糖尿病建模藥品試劑81

5、15病理切片與與細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)試劑設(shè)備8116小鼠血清NO、iNO及胰島素檢測(cè)實(shí)驗(yàn)設(shè)備912昆明小鼠的分組及處理913小鼠血糖、體質(zhì)量變化及糖尿病發(fā)生情況檢測(cè)1014小鼠血清N0測(cè)定1015小鼠血清iNO測(cè)定一1016小鼠血清胰島素水平檢測(cè)(ELISA法)1117胰腺病理切片制備一1218小鼠胰島B細(xì)胞凋亡檢測(cè)1319統(tǒng)計(jì)學(xué)處理15第2章結(jié)果1621黃芪對(duì)各組小鼠糖尿病發(fā)病率的影響1622小鼠血糖、體質(zhì)量變化1623小鼠血清iNOS活力、