創(chuàng)傷性失血性休克模型兔在腹主動脈下段阻斷不同時相缺血再灌注損傷相關指標變化的研究.pdf

1、目的：在創(chuàng)傷性失血性休克兔模型下，觀察腹主動脈下段阻斷不同時相后肢缺血與再灌注損傷相關的生理、生化及病理的變化，探討創(chuàng)傷性失血性休克模型兔腹主動脈下段阻斷可行性和安全時限。
　　 方法：
　　 1、動物分組和不同時相方案
　　 分組：把41只兔子分為3組，S組(創(chuàng)傷性失血性休克組)9只，B(腹主動脈下段阻斷)、R(腹主動脈下段阻斷復灌)組32只S組：創(chuàng)傷性失血性休克組，其中30分鐘、60分鐘、90分鐘、120分鐘

2、各取病理1例；S30、S60、S90、S120分別代表休克30分鐘、60分鐘、90分鐘、120分鐘。
　　 B組：創(chuàng)傷性失血性休克腹主動脈下段阻斷不同時相阻斷，其中阻斷30分鐘、60分鐘、90分鐘、120分鐘各8只，其中不同時相阻斷取病理2例；B30、B60、B90、B120分表代表阻斷30分鐘、60分鐘、90分鐘、120分鐘。
　　 R組：按B組創(chuàng)傷性失血性休克腹主動脈下段阻斷不同時相及再灌120分鐘后再取病理2例；R

3、30、R60、R90、R120分表代表阻斷30分鐘、60分鐘、90分鐘、120分鐘再灌注120分鐘。
　　 2、創(chuàng)傷性失血性休克兔模型的制備
　　 30％烏拉坦(氨基甲酸己脂)以1000mg/kg耳緣靜脈注入麻醉，解剖頸部，分離出氣管并切開接高頻呼吸機輔助呼吸(潮氣量為10ml/Kg)，分別分離出頸內動脈、頸內靜脈并置入留置管(肝素封管)，靜脈接輸液瓶，用于補液、回輸血液及搶救使用，動脈接三通管，一端用于抽血使用，一端接

4、生理多導儀，開始記錄血壓、心率及呼吸頻率；用三角鐵同等力度打斷雙股骨，等待20分鐘后，全身肝素化(3.0mg/kg，iv)后，按10ml/kg快速放血約15±5ml，(放出血肝素化裝入儲血瓶，以備做為抗休克使用，)在10分鐘內使平均動脈壓維持在45±5mmHg，并維持30分鐘；解剖下腹部，分離出腹主動脈下段及髂總動脈分叉處，使用動脈血管鉗夾閉髂總動脈分叉上約1-1.5CM腹主動脈處，見夾閉處以下腹主動脈變癟及不能觸摸到阻斷以下動脈搏動為

5、此；回輸儲存在儲血瓶內肝素化的血液，補生理鹽水約，去甲腎上腺素維持血壓在90±5mmHg；分別夾閉缺血30分鐘、60分鐘、90分鐘、120分鐘再放松動脈血管鉗恢復血流，繼續(xù)使用生理鹽水、鹽酸去甲腎上腺素靜脈滴注維持血壓90±5mmHg再灌注2小時；在各個時相點觀察生理指標，采血查生化指標，并取病理標本；對照組解剖下腹部，分離出腹主動脈下段及髂總動脈分叉，不夾閉腹主動脈下段，只回輸儲存在儲血瓶內肝素化的血液，補生理鹽水、去甲腎上腺素維持血

6、壓在45±5mmHg，在各個時相點觀察生理指標，采血查生化指標，并取病理標本。
　　 3、創(chuàng)傷性失血性休克模型兔建立，腹主動脈下段阻斷不同時相及再灌注對兔生理指標的影響
　　 動物模型制作成功后，在不同的時相點通過觀測動物的心率、呼吸頻率，血壓監(jiān)測。
　　 4、創(chuàng)傷性失血性休克模型兔建立，腹主動脈下段阻斷不同時相及再灌注對兔生化指標的影響。
　　 分別于相應時相點從頸內動脈采集兩管動脈血，一管即刻查血氣分

7、析，一管靜置后離心取上清液，檢測天門冬氨酸基轉移酶(AST)、肌酸磷酸激酶(CPT)、超強化歧化酶(SOD)，苯二醛(MDA)。
　　 5、阻斷不同時間后復灌對兔心、腦、肺、腎、腓腸肌組織病理學改變的影響
　　 按要求阻斷不同時間以及復灌后，迅速活取實驗動物的心、腦、肺、腎、腓腸肌組織，制成蠟快切片，通過觀察腓腸肌心、腦、肺、腎、腓腸肌組織在光鏡下病理改變，觀察阻斷不同時間以及復灌對兔心、腦、肺、腎組織病理學改變的影響。

8、
　　 結果：
　　 1、創(chuàng)傷性失血性休克兔腹主動脈下段阻斷不同時相生理指標的變化心率：休克對照組(S)：心率逐漸下降，特別是S60、S90、S120組間具有明顯差異，有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；阻斷組(B)：心率輕度緩慢下降，B30、B60、B90、B120組間無明顯差異，不具有統(tǒng)計學差異(P>0.05)；再灌注組(R)：心率逐漸下降R30、R60與阻斷前B30、B60下降不明顯不具有統(tǒng)計學意義(P>0.05)，R9

9、0、R120與阻斷前B90、B120下降明顯，具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。血壓：按實驗要求放血及回輸血液、平衡液、去甲腎上腺素維持血壓。呼吸：休克對照組(S)：呼吸頻率緩慢下降，S30、S60、S90之間改變不明顯，不具有統(tǒng)計學差異(P>0.05)，但是S120時下降明顯，與S30、S60、S90比具有明顯差異，有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；阻斷組(B)：呼吸頻率輕度緩慢下降，B30、B60、B90、B120組間無明顯差異，不具有統(tǒng)

10、計學差異(P>0.05)；再灌注組(R)：呼吸頻率逐漸下降R30、R60與阻斷前B30、B60下降不明顯不具有統(tǒng)計學意義(P>0.05)，R90、R120與阻斷前B90、B120下降明顯，具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1及圖1、2。
　　 2、創(chuàng)傷性失血性休克兔腹主動脈下段阻斷不同時相血氣指標的變化
　　 PH值：休克對照組(S)PH值逐漸下降，特別是S60、S90、S120組間具有明顯差異，有統(tǒng)計學意義(P<0.

11、05)；阻斷組(B)：PH值輕度緩慢下降，B30、B60、B90、B120組間無明顯差異，不具有統(tǒng)計學差異(P>0.05)；再灌注組(R)：PH值逐漸下降R30、R60與阻斷前B30、B60下降不明顯不具有統(tǒng)計學意義(P>0.05)，R90、R120與阻斷前B90、B120下降明顯，具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 乳酸：休克對照組(S)乳酸值逐漸上升，特別是T30、T60、T90、T120組間具有明顯差異，有統(tǒng)計學意義(

12、P<0.05)；阻斷組(B)：乳酸值輕度緩慢下降，T30、T60、T90、T120組間無明顯差異，不具有統(tǒng)計學差異(P>0.05)；再灌注組(R)：PH值逐漸下降R30、R60與阻斷前B30、B60下降不明顯不具有統(tǒng)計學意義(P>0.05)，R90、R120與阻斷前B90、B120明顯上升，具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2及圖3、4。
　　 3、創(chuàng)傷性失血性休克兔腹主動脈下段阻斷不同時相生化指標的變化
　　 CPK

13、值：休克對照組(S)CPK逐漸緩慢上升，S30、S60、S90、S120組間不具有明顯差異，不具有統(tǒng)計學意義(P>0.05)；阻斷組(B)：CPK輕度緩慢上升，B30、B60、B90、B120組間無明顯差異，不具有統(tǒng)計學差異(P>0.05)；再灌注組(R)：CPK值逐漸上升R30、R60與阻斷前B30、B60上升不明顯不具有統(tǒng)計學意義(P>0.05)，R90、R120與阻斷前B90、B120上升明顯，具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

14、r>　　 AST值：休克對照組(S)AST逐漸緩慢上升，S30、S60、S90、S120組間不具有明顯差異，不具有統(tǒng)計學意義(P>0.05)；阻斷組(B)：輕度緩慢上升，B30、B60、B90、B120組間無明顯差異，不具有統(tǒng)計學差異(P>0.05)；再灌注組(R)：AST值逐漸上升R30、R60與阻斷前B30、B60上升不明顯不具有統(tǒng)計學意義(P>0.05)，R90、R120與阻斷前B90、B120上升明顯，具有統(tǒng)計學意義(P<0.

15、05)
　　 SOD值：休克對照組(S)SOD逐漸下降，S30、S60、S90、S120組間不具有明顯差異，不具有統(tǒng)計學意義(P>0.05)；阻斷組(B)：SOD輕度緩慢下降，B30、B60、B90、B120組間無明顯差異，不具有統(tǒng)計學差異(P>0.05)；再灌注組(R)：SOD值逐漸下降R30、R60與阻斷前B30、B60下降不明顯不具有統(tǒng)計學意義(P>0.05)，R90、R120與阻斷前B90、B120下降明顯，具有統(tǒng)計學意

16、義(P<0.05)。
　　 MDA值：休克對照組(S)MDA逐漸上升，S30、S60、S90、S120組間不具有明顯差異，不具有統(tǒng)計學意義(P>0.05)；阻斷組(B)：MDA輕度緩慢下降，B30、B60、B90、B120組間無明顯差異，不具有統(tǒng)計學差異(P>0.05)；再灌注組(R)：MDA值逐漸下降R30、R60與阻斷前B30、B60下降不明顯不具有統(tǒng)計學意義(P>0.05)，R90、R120與阻斷前B90、B120下降明顯

17、，具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3及圖5、6、7、8。
　　 4、創(chuàng)傷性失血性休克兔腹主動脈下段阻斷不同時相病理改變的影響
　　 (1)心組織病理變化：休克對照組：S30出現(xiàn)輕度水腫，S60、S90、S120即出現(xiàn)心肌細胞水腫明顯，橫縱紋模糊不清，血管擴張淤血，局部出血；阻斷時(B)B30、B60、B90、B120出現(xiàn)輕度水腫；再灌注組(R)R30、R60輕度水腫，R90、R120出現(xiàn)局部肌纖維排列紊亂，正常結構消

18、失。
　　 (2)腦組織病理變化：休克對照組：S30出現(xiàn)腦實質細胞輕度腫脹，S60、S90、S120即腦組織腫脹明顯，部分膠質細胞增生，腦血管擴張；阻斷時(B)B30、B60、B90、B120出現(xiàn)腦實質輕度腫脹；再灌注組(R)R30、R60腦實質輕度腫脹，R90、R120出現(xiàn)腦組織腫脹明顯，部分細胞變性壞死。
　　 (3)肺組織病理變化：休克對照組：S30出現(xiàn)輕度肺水腫，S60、S90、S120、即出現(xiàn)肺水腫明顯伴有出血

19、；阻斷時(B)B30、B60、B90、B120出現(xiàn)輕度肺水腫；再灌注組(R)R30、R60輕度肺水腫，R90、R120出現(xiàn)肺組織中見紅細胞滲出、肺泡上皮細胞增生明顯伴淋巴細胞浸潤。
　　 (4)腎組織的病理變化：休克對照組：S30、S60、S90出現(xiàn)腎小球輕度擴張淤血，腎小管上皮輕度水腫；S120出現(xiàn)腎小盂輕度空泡變性，腎小球毛細血管淤血、出血；阻斷時(B)B30、B60、B90、B120出現(xiàn)腎小球輕度擴張淤血，腎小管上皮輕度水

20、腫；再灌注組(R)R30、R60、R90腎小球輕度擴張淤血，腎小管上皮輕度水腫，R120出現(xiàn)腎小盂輕度空泡變性，腎小球毛細血管淤血、出血。
　　 (5)腓腸肌組織病理變化：休克對照組：S30、S60、S90、S120出現(xiàn)輕度水腫改變；阻斷時(B)B30、B60、B90、B120出現(xiàn)輕度水腫改變；再灌注組(R)R30、R60水腫明顯改變，R90、R120出現(xiàn)肌細胞部分溶解、壞死。
　　 結論：
　　 1.腹主動脈下

21、段阻斷后復蘇，其在120分鐘內其阻斷平面組織及器官灌注改善，有益于糾正休克。
　　 2.腹主動脈阻斷以下平面下肢骨骼肌不同時相缺血再灌注損傷，其阻斷30分鐘、60分鐘復灌120分鐘全身生理、生化及病理變化不明顯；阻斷90分鐘復灌120分鐘其生理、生化變化明顯，其重要臟器(心、腦、肺、腎)病理水腫明顯、輕度出血、以及局部細胞空泡變性改變，腓腸肌組織水腫明顯；阻斷120分鐘復灌120分鐘，其全身生理、生化顯著變化，重要臟器(心、腦、