不同再灌注-缺血時(shí)間間隔的缺血后處理對(duì)兔睪丸缺血再灌注損傷的影響.pdf

1、目的：探討不同再灌注/缺血時(shí)間間隔的缺血后處理對(duì)急性單側(cè)睪丸不同程度缺血后再灌注損傷的影響和相關(guān)機(jī)制。
　　 方法：54只成年新西蘭大白兔隨機(jī)分成9組,每組6只:對(duì)照組(S)；缺血再灌注組(A0、B0)；缺血后處理組(A1、A2、A3、B1、B2、B3)；缺血再灌注組、缺血后處理組在超聲監(jiān)測(cè)下行單側(cè)精索不全結(jié)扎建立急性單側(cè)睪丸缺血模型,根據(jù)睪丸內(nèi)血流信號(hào)分布分為輕度缺血組(A組)和中度缺血組(B組)。缺血再灌注組直接恢復(fù)血流再灌

2、注；缺血后處理組于恢復(fù)再灌注前實(shí)施3次短暫的再灌注/缺血(R/I)循環(huán),A1和B1、A2和B2、A3和B3,再灌注/缺血時(shí)間間隔分別為15s/15s、30s/30s、45s/45s。各組在術(shù)前、再灌注前及恢復(fù)灌注后3天均行超聲造影檢查,分析造影參數(shù)β、TTP、PBD、DT/2變化。恢復(fù)灌注后3天,觀測(cè)術(shù)側(cè)睪丸組織MDA、SOD、外周血睪酮含量及caspase-3、Bcl-2的蛋白表達(dá),光鏡下觀察病理變化(HE染色)進(jìn)行Johnsen’s

3、評(píng)分,Tunel法檢測(cè)細(xì)胞凋亡并計(jì)算凋亡指數(shù)(AI),電鏡下觀察超微結(jié)構(gòu)變化。
　　 結(jié)果：與S組相比,再灌注前,A0、A1、A2、A3組造影曲線峰值均低平后移,B0、B1、B2、B3組則低平后移更明顯,A0、A1、A2、A3組兩兩比較以及B0、B1、B2、B3組兩兩比較各造影參數(shù)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)?；謴?fù)灌注3天后,與S組相比,A0、A1、A2、A3組造影曲線峰值升高前移,B0、B1、B2、B3組則升高前移更明顯,A

4、0、A1、A2、A3組兩兩比較以及B0、B1、B2、B3組兩兩比較各造影參數(shù)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。睪丸組織MDA含量隨缺血程度增加而升高,各組MDA含量相比較:A1、A2組MDA含量顯著低于A0組(P<0.05),A3組與A0組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),A2組MDA含量顯著低于A1、A3組(P<0.05)；B2組顯著低于B0組和B3組(P<0.05),B1、B3組與B0組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。睪丸組織SOD含量隨缺

5、血程度增加而降低,各組SOD含量相比較:A1、A2組顯著高于A0組(P<0.05),A3組與A0組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),A2組顯著高于A3組(P<0.05):B1、B2組顯著高于B0組(P<0.05),B3組與B0組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),B2組SOD含量顯著高于B3組(P<0.05)。外周血睪酮含量隨缺血程度增加而降低,各組睪酮含量相比較:A1、A2組顯著高于A0組和A3組(P<0.05),A3組與A0組以及A1組與

6、A2組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；B1、B2組顯著高于B0組(P<0.05),B3組與B0組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),B2組顯著高于B1、B3組(P<0.05)。caspase-3蛋白表達(dá)隨缺血程度的增加而呈升高,各組caspase-3蛋白表達(dá)相比較:A1、A2組顯著低于A0組(P<0.05),A3組與A0組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),A2組顯著低于A1、A3組(P<0.05)；B2組顯著低于B0組(P<0.05),B1、B3組

7、與B0組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。Bcl-2蛋白表達(dá)隨缺血隨缺血程度加重而降低,各組Bcl-2蛋白表達(dá)組內(nèi)相比較:A2組顯著高于A0、A1、A3組(P<0.05),但A0、A1、A3組兩兩相比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),B0、B1、B2、B3組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。Johnsen's評(píng)分隨缺血程度增加而減少,各組Johnsen’s評(píng)分相比較:A2組顯著高于A0、A3組(P<0.05),A1、A3組與A0組無統(tǒng)

8、計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；B0、B1、B2、B3組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。AI隨著缺血程度加重而升高,各組AI相比較:A1、A2組顯著低于A0組(P<0.05),A3組與A0組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),A2組顯著低于A3組(P<0.05)；B2組顯著低于B0、B3組(P<0.05),B1、B3組與B0組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。電鏡下,隨著缺血程度的增加,生精細(xì)胞層次紊亂加重,生精細(xì)胞和精子數(shù)量逐漸減少,膜性結(jié)構(gòu)連續(xù)