棉布為載體金屬螯合親和膜的制備及性能研究.pdf

1、固定金屬螯合親和膜是一種有效的蛋白質(zhì)分離純化技術(shù)。本文主要研究了棉布作為親和膜基質(zhì)的可行性，采用環(huán)氧活化法對(duì)棉布進(jìn)行改性，制備Cu<'2+>-IDA金屬螯合親和膜，對(duì)其制備工藝、蛋白質(zhì)吸附性能及對(duì)蛋白質(zhì)的分離純化進(jìn)行了研究，結(jié)果表明棉布作為膜載體具有一定的研究?jī)r(jià)值。 通過(guò)對(duì)不同棉含量的布進(jìn)行比較確定了以100％純棉布作為親和膜的載體，它具有較好的儲(chǔ)藏穩(wěn)定性，溶劑適用范圍較廣，可以保存在20％乙醇、空氣和去離子水中三個(gè)月，銅結(jié)合量

2、基本不變。通過(guò)重復(fù)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明膜具有較好的重復(fù)使用性能。 通過(guò)單因素和正交試驗(yàn)得出最佳的活化反應(yīng)和偶聯(lián)反應(yīng)條件。活化反應(yīng)最佳條件：活化溫度為30℃，NaOH濃度為2.0mol/L,活化時(shí)間為4h，振蕩頻率為155r/min;偶聯(lián)反應(yīng)最佳條件：IDA用量為1.2g，偶聯(lián)溫度為50℃，偶聯(lián)時(shí)間為10h。 用此膜介質(zhì)吸附溶菌酶時(shí)，1h左右達(dá)到吸附平衡；隨著溫度的升高，溶菌酶吸附量增加；離子強(qiáng)度的影響恰好相反，在低離子強(qiáng)度下，

3、吸附量大，高離子強(qiáng)度下，吸附量下降。最佳pH為7.0時(shí)既可達(dá)到最佳吸附量又可防止蛋白質(zhì)變性。親和膜介質(zhì)對(duì)溶菌酶的等溫吸附線很好的符合Langmuir形式，經(jīng)曲線擬合可知最大吸附容量Q<,m>為0.50mg/cm<'2>親和膜。 以棉布為載體制備親和膜柱，確定了用此柱進(jìn)行蛋白質(zhì)分離純化時(shí)的上樣、淋洗、吸脫速度，分別為：0.8mL/min、1.6mL/min、2.0mL/min。在此條件下，選用蛋清蛋白和乳清蛋白這兩個(gè)天然多蛋白體系