腹膜返折上方大腸癌腹腔微轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)及臨床意義.pdf

1、目的：比較細(xì)胞學(xué)檢查、基于分支DNA(b-DNA)信號(hào)放大的基因表達(dá)定量檢測(cè)技術(shù)及半定量RT-PCR(SqRT-PCR)方法在大腸癌腹腔脫落癌細(xì)胞(ECC)檢測(cè)中的應(yīng)用,并探討大腸癌患者術(shù)中腹水或腹腔沖洗液(腹腔液)CEA、GCC和CD44v6 mRNA的表達(dá)情況及臨床意義,旨在為臨床上預(yù)測(cè)大腸癌腹腔微轉(zhuǎn)移尋找更加特異、敏感的檢測(cè)方法和指標(biāo)。
　　 方法：術(shù)中收集48例大腸癌患者和12例大腸良性病變病人的腹水或腹腔沖洗液,分別采

2、用基于b-DNA信號(hào)放大的基因表達(dá)定量檢測(cè)技術(shù)和SqRT-PCR方法檢測(cè)腹腔液中游離癌細(xì)胞CEA mRNA的表達(dá),同時(shí)行腹腔沖洗液細(xì)胞學(xué)檢查(PLC),以篩選出對(duì)檢測(cè)大腸癌ECC較敏感的方法,進(jìn)而用該法測(cè)定腹腔液中脫落癌細(xì)胞CEA、GCC和CD44v6 mRNA的表達(dá),并結(jié)合臨床相關(guān)資料分析CEA、GCC和CD44v6 mRNA表達(dá)的臨床意義。
　　 結(jié)果：b-DNA技術(shù)和SqRT-PCR方法檢測(cè)大腸癌患者腹腔ECC的陽性率[4

3、3.8％(21/48),31.3％(15/48)]均高于PLC法[4.2％(2/48)],兩者差異顯著(P<0.01)；大腸癌組腹腔液CEA、GCC、CD44v6的表達(dá)陽性率分別為43.8％(21/48)、60.4％(29/48)、31.3％(15/48),總陽性率為72.9％(35/48),明顯高于腹腔液PLC的2％(1/48)；上述3項(xiàng)指標(biāo)在人大腸癌細(xì)胞株SW480中表達(dá)均為陽性,在陰性對(duì)照組中有1例CEA mRNA檢出陽性,其余均

4、為陰性表達(dá)；不同Dukes分期、腫瘤分化程度、漿膜侵犯程度、有否淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移對(duì)CEA、GCC和CD44v6 mRNA的陽性表達(dá)率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),不同腫瘤大小、患者年齡和性別差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 結(jié)論：b-DNA技術(shù)和SqRT-PCR方法檢測(cè)腹腔ECC各有優(yōu)缺點(diǎn),均是預(yù)測(cè)大腸癌腹腔微轉(zhuǎn)移的有效方法,但b-DNA技術(shù)操作更為簡(jiǎn)單,影響因素少,其相對(duì)定量結(jié)果更為可靠、精確；GCC、CD44v6與CE