產(chǎn)酶溶桿菌抗菌活性物質(zhì)產(chǎn)率促進(jìn)及其應(yīng)用.pdf

1、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，化學(xué)農(nóng)藥的長(zhǎng)期使用，導(dǎo)致了生態(tài)環(huán)境的惡化，為此，開(kāi)發(fā)環(huán)境友好的生物源農(nóng)藥成了重點(diǎn)研究領(lǐng)域。
　　產(chǎn)酶溶桿菌是一株新型生防菌，其次級(jí)代謝產(chǎn)物HSAF具有廣譜的抗真菌活性，可以開(kāi)發(fā)為良好的生物源農(nóng)藥，為達(dá)到此目的，本研究分3步進(jìn)行了培養(yǎng)基優(yōu)化試驗(yàn):1.通過(guò)替換不同氮源及碳源，確立黃豆粉為最佳氮源，葡萄糖為最佳碳源，最佳氮源和碳源分別設(shè)置3個(gè)濃度（黃豆粉濃度為0.50％、0.70％、0.90％;葡萄糖濃度為0.30％、0.5

2、0％、0.70％）進(jìn)行HSAF產(chǎn)率比較，初步得到碳氮源最佳配比:0.70％黃豆粉+0.50％葡萄糖;2.利用氮源和碳源最佳配比，比較不同無(wú)機(jī)鹽對(duì)HSAF產(chǎn)量的影響;3.三因素三水平的正交試驗(yàn)，比較結(jié)果表明:黃豆粉0.70％、葡萄糖0.50％、氯化鈣0.08％為最佳組合，其能夠提高產(chǎn)酶溶桿菌HSAF產(chǎn)量13.9倍，且發(fā)酵成本可降低68％。除此以外，本研究還對(duì)產(chǎn)酶溶桿菌的發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化，主要考慮了溫度、轉(zhuǎn)速及發(fā)酵時(shí)間等因素，HSAF在2

3、8℃，200 rpm，搖瓶60 h時(shí)產(chǎn)量最大。最后進(jìn)行了刺激因子添加實(shí)驗(yàn)，采用產(chǎn)酶溶桿菌靶標(biāo)生物禾谷鐮孢菌的多糖物質(zhì)作為刺激因子，觀察其對(duì)HSAF的刺激作用，因?qū)嶒?yàn)條件有限僅得到了少量的粗多糖，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨著粗多糖添加量的增多，HSAF的含量呈不斷下降的趨勢(shì)。
　　為了進(jìn)一步探明產(chǎn)酶溶桿菌OH11發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)主要農(nóng)業(yè)病害的防控效果，本研究采用優(yōu)化后的培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵、物理吸附、65℃烘干濃縮獲得發(fā)酵液固化物，采用平板抑菌、盆栽和田

4、間接種等方法，測(cè)試了發(fā)酵液固化物對(duì)幾種農(nóng)作物重要病害的防控效果。以其代謝產(chǎn)物HSAF的量表示，發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)稻瘟病菌、稻紋枯病菌、禾谷鐮孢菌的菌絲生長(zhǎng)抑制EC50分別為2.1326、2.1457、3.6959μg/mL，對(duì)禾谷鐮孢菌孢子萌發(fā)抑制EC50為12.2587μg/mL;對(duì)溫室盆栽小麥白粉病具有保護(hù)和一定的治療效果，用藥22 d，10.24μg/mL發(fā)酵液的保護(hù)防效為58.15％，而150μg/mL三唑酮的保護(hù)防效為45.93％。田

5、間處理14d，96.0 g a.i./hm2發(fā)酵液對(duì)小麥赤霉病保護(hù)與治療效果分別為20.29％，21.14％，而1110.0 g a.i./hm2的多菌靈為13.39％，12.00％;2014年，自然發(fā)病情況下，田間處理28 d，1.53 ga.i./hm2發(fā)酵液對(duì)小麥赤霉病的防治效果達(dá)到76.40％，優(yōu)于對(duì)照藥劑300.0mL/hm2的30％苯甲·丙環(huán)唑乳油。由此可見(jiàn)，溶桿菌發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)幾種農(nóng)作物重要病害均具有防治效果，具有開(kāi)發(fā)利用前景