高產(chǎn)纖維素酶枯草芽孢桿菌的篩選、應(yīng)用及其產(chǎn)酶條件研究.pdf

1、膳食纖維(Dietary fiber,DF)具有多種生理功能,被譽(yù)為人體的“第七大營(yíng)養(yǎng)素”。其中的可溶性成分SDF(Soluble Dietary fiber,SDF),擁有比不溶性成分IDF(Insoluble Dietary fiber,IDF)更優(yōu)的生理活性,具有較高應(yīng)用價(jià)值和重要的研究意義。豆渣在我國(guó)產(chǎn)量巨大,其富含的纖維素類物質(zhì)是SDF的理想來(lái)源。但是豆渣中天然的SDF較少,因此,必須進(jìn)行一定的技術(shù)處理,以提高豆渣SDF的含量

2、與得率。當(dāng)前,以發(fā)酵技術(shù)和酶技術(shù)為代表的生物技術(shù),被認(rèn)為是最有發(fā)展?jié)摿Φ募夹g(shù)手段之一,而菌種和酶類的選擇與確定,則尤為重要。枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)的諸多優(yōu)點(diǎn),使其成為產(chǎn)酶和應(yīng)用菌種的首選。
　　 為此,本論文研究了高產(chǎn)纖維素酶枯草芽孢桿菌菌株的篩選、發(fā)酵豆渣制備SDF的應(yīng)用及其產(chǎn)纖維素酶的條件,研究結(jié)果如下:
　　 1、從自然界篩選獲得一株產(chǎn)纖維素活力較高的枯草芽孢桿菌,并根據(jù)實(shí)驗(yàn)中的編號(hào)順序

3、,命名為BS-05。在篩選的自然條件下,該菌株產(chǎn)纖維素酶活力較高,羧甲基纖維素酶活力(Sodium carboxymethylcellulose activity,CMCA)和濾紙酶活力(Filter Paper Activity,FPA)分別為57.27 U/ml和58.97 U/ml。
　　 2、應(yīng)用菌株BS-05發(fā)酵豆渣,并聯(lián)用均質(zhì)技術(shù),制備了高含量的豆渣SDF。豆渣經(jīng)發(fā)酵與均質(zhì)處理后,SDF的得率提高約4倍。并且,與未發(fā)

4、酵的豆渣SDF。相比,發(fā)酵獲得的SDF顆粒變小,結(jié)構(gòu)變松散,其溶解性與持水力等理化性質(zhì)都有不同程度的改善。
　　 3、研究獲得了菌株BS-05產(chǎn)纖維素酶的最佳條件。其產(chǎn)酶培養(yǎng)基組成是:CMC-Na2％、蛋白胨2％、酵母粉2％、NaCl0.5％,K2HPO40.1％,MgSO4·7H2O0.02％；最優(yōu)的培養(yǎng)條件是:培養(yǎng)溫度37℃、培養(yǎng)基初始pH7、接種量5％、培養(yǎng)時(shí)間48h和產(chǎn)酶培養(yǎng)基裝液量為60/250ml。在上述條件下,該菌