uNK細胞在人類早孕蛻膜血管生成中的作用.pdf

1、目的：通過研究子宮自然殺傷細胞(uNK)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、促血管生成素2(Ang2)在人類早孕子宮蛻膜中的表達及相關(guān)性分析，明確uNK細胞在人類早孕蛻膜血管生成中的作用機制。 方法：收集2005年9月-2005年10月在四川大學(xué)華西附二院婦產(chǎn)科擬行人工流產(chǎn)終止妊娠、年齡在19-39歲的45例早孕婦女的蛻膜組織，采用免疫組化的方法檢測CD56、vEGF、FLKl、Ang2、Tie2和CD31在子宮蛻膜中的表達。同時采

2、用CD56單克隆抗體快速染色子宮蛻膜冰凍組織切片，通過激光顯微切割獲得單個uNK細胞，進行巢式PCR的方法檢測VEGF mRNA和Ang2 mRNA在單個uNK細胞中的表達。采用秩相關(guān)統(tǒng)計方法進行相關(guān)性分析。 結(jié)果：1、uNK細胞(CD56<'+>)大量存在于子宮蛻膜間質(zhì)中，主要集中在血管和腺體周圍的間質(zhì)中，uNK細胞的胞膜或胞漿呈現(xiàn)陽性。uNK細胞在子宮蛻膜問質(zhì)中的陽性率為23％(9％-46％)。 2、蛻膜組織中血管豐

3、富，CD31特異性的表達于血管內(nèi)皮細胞中，平均微血管密度(MVD)為5.5士2.3，與間質(zhì)中uNK細胞的陽性表達率呈正相關(guān)(r=0.648,p<0.01)。 3、VEGF蛋白在子宮蛻膜腺上皮細胞、血管內(nèi)皮細胞以及間質(zhì)細胞中皆有表達，蛻膜間質(zhì)中VEGF表達陽性率為14％(3％-29％)。uNK細胞的陽性率與VEGF表達陽性率呈正相關(guān)(r=0.53，P<0.01)。 4、Ang2蛋白在子宮蛻膜腺上皮細胞、蛻膜間質(zhì)細胞中都有表

4、達，蛻膜問質(zhì)中Ang2表達陽性率為15％(5％-33％)。uNK細胞陽性率與Ang2表達陽性率無相關(guān)性(r=0.24，P>0.05)。 5、蛻膜間質(zhì)中VEGF的陽性表達率與MVD呈正相關(guān)(r=0.891，p<0.01)，而間質(zhì)中Ang2陽性表達率與MVD無相關(guān)性(r=0.217，P>0.05)。 6、單uNK細胞巢式PCR顯示：VEGF和Ang2內(nèi)側(cè)引物擴增后Ct值分別為35、25，VEGF在單個uNK細胞中的基因拷貝數(shù)

5、約為4×10<'2>，Ang2在單個uNK細胞中的基因拷貝數(shù)約為2×10<'5>。 結(jié)論：本研究發(fā)現(xiàn)人類早孕子宮蛻膜中uNK細胞與微血管密度、vEGF表達程度呈正相關(guān)，說明uNK細胞在早孕蛻膜血管生成中起到重要作用。通過單uNK細胞的巢式PCR研究，本研究首次發(fā)現(xiàn)人類早孕蛻膜uNK細胞可以表達VEGF mRNA和Ang2 mRNA，由此推測在人類早孕蛻膜組織中，uNK細胞可能通過自身表達的VEGF和Ang2來發(fā)揮促進蛻膜血管生成