復(fù)方青黛顆粒聯(lián)合柳氮磺胺嘧啶對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠CRP及炎性細(xì)胞因子IL-1β、TNF-α和IL-4影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)通過建立TNBS/乙醇誘導(dǎo)的大鼠潰瘍性結(jié)腸炎(UC)模型，在復(fù)方青黛顆?；A(chǔ)上聯(lián)合應(yīng)用柳氮磺胺嘧啶(SASP)治療UC大鼠，觀察中西醫(yī)結(jié)合療法(SASP+復(fù)方青黛顆粒)對(duì)UC大鼠的治療效果及對(duì)UC大鼠CRP與炎性細(xì)胞因子IL-1β、TNF-α和IL-4的影響，分析評(píng)價(jià)各個(gè)統(tǒng)計(jì)指標(biāo)的動(dòng)態(tài)變化及臨床意義，并通過對(duì)中西醫(yī)結(jié)合療法與單獨(dú)柳氮磺胺嘧啶、復(fù)方青黛顆粒治療UC的療效及其差異的比較，探討中西醫(yī)結(jié)合治療UC的有效性及可能的作用

2、機(jī)制，從而為中西醫(yī)結(jié)合治療UC提供更多的理論及臨床依據(jù)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
　　方法:SD雄性大鼠50只，隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、SASP組、復(fù)方青黛顆粒組和中西醫(yī)結(jié)合組，每組10只，除空白對(duì)照組外，其余各組給予TNBS/乙醇造模，然后將造模成功的大鼠及空白對(duì)照組大鼠給予相應(yīng)處理: SASP組給予SASP(500mg/kg)混懸劑5毫升/次，復(fù)方青黛顆粒組給予復(fù)方青黛顆粒(1200mg/kg)混懸劑5毫升/次，中西醫(yī)結(jié)合組給予

3、復(fù)方青黛顆粒(1200mg/kg)與SASP(500mg/kg)混懸劑5毫升/次，空白對(duì)照組及模型對(duì)照組分別給予滅菌用水5毫升/次。于造模后第3天開始灌胃治療，連續(xù)給藥兩周。實(shí)驗(yàn)期間每日記錄大鼠體重、毛發(fā)光澤、大便性狀和便血情況并給予疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)評(píng)分。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)及結(jié)束后采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法分別測(cè)定大鼠血清CRP、TNF-α和結(jié)腸粘膜組織IL-1β及IL-4的含量，并行結(jié)腸粘膜組織損傷程度評(píng)分及HE染色鏡下觀察。

4、　　結(jié)果:1、DAI評(píng)分:實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)各組DAI評(píng)分，與模型對(duì)照組比較，中西醫(yī)結(jié)合組能夠明顯降低UC大鼠DAI評(píng)分(0.85±0.65vs2.85±0.58, P＜0.01),SASP組(1.05±0.58vs2.85±0.58,P＜0.01)，復(fù)方青黛顆粒組(1.10±0.73vs2.85±0.58，P＜0.01); SASP組與復(fù)方青黛顆粒組比較（1.05±0.58vs1.10±0.73，P=0.17），差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與中西醫(yī)結(jié)合

5、組比較，SASP組(1.05±0.58vs0.85±0.65，P＜0.01)，復(fù)方青黛顆粒組(1.10±0.73vs0.85±0.65，P＜0.01)，差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2、結(jié)腸粘膜組織損傷評(píng)分:實(shí)驗(yàn)結(jié)束后行各組結(jié)腸粘膜損傷評(píng)分，與模型對(duì)照組比較，中西醫(yī)結(jié)合組能夠明顯降低結(jié)腸粘膜損傷評(píng)分（0.70±0.48vs3.30±0.82，P＜0.01），SASP組(1.50±0.53vs3.30±0.82，P＜0.01)，復(fù)方青黛顆粒組(

6、1.20±0.42vs3.30±0.82，P＜0.01); SASP組與復(fù)方青黛顆粒組比較(1.50±0.53vs1.10±0.73，P=0.24)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與中西醫(yī)結(jié)合組比較，SASP組(1.50±0.53vs0.70±0.48，P＜0.01)，差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，復(fù)方青黛顆粒組（1.20±0.42vs0.70±0.48，P=0.54），差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3、血清CRP含量的檢測(cè):實(shí)驗(yàn)結(jié)束后血清CRP含量與空白對(duì)照組比較

7、，模型對(duì)照組血清CRP水平明顯升高(122.13±13.15vs42.69±9.47，P＜0.01);與模型對(duì)照組比較，中西醫(yī)結(jié)合組降低血中CRP最為明顯(69.03±4.95vs122.13±13.15, P＜0.01), SASP組(81.77±8.65vs122.13±13.15, P＜0.01)和復(fù)方青黛顆粒組（86.27±4.55vs122.13±13.15，P＜0.01）亦明顯下降;SASP組與復(fù)方青黛顆粒組比較（81.77

8、±8.65vs86.27±4.55，P=0.256），差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與中西醫(yī)結(jié)合組比較，SASP組(81.77±8.65vs69.03±4.95，P＜0.05)，復(fù)方青黛顆粒組（86.27±4.55vs69.03±4.95，P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4、血清TNF-α含量檢測(cè):實(shí)驗(yàn)結(jié)束后血清TNF-α含量與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組血中TNF-α水平明顯升高(151.54±14.32 vs62.70±11.13，P＜0.0

9、1);與模型對(duì)照組比較，中西醫(yī)結(jié)合組降低血清TNF-α較為明顯(80.49±6.68vs151.54±14.32，P＜0.01)，SASP組(99.21±3.17vs151.54±14.32，P＜0.01)和復(fù)方青黛顆粒組(103.93±7.27vs151.54±14.32，P＜0.01)亦有下降;SASP組與復(fù)方青黛顆粒組比較（99.21±3.17vs103.93±7.27，P=0.265），差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與中西醫(yī)結(jié)合組比較，SA

10、SP組(99.21±3.17vs80.49±6.68，P＜0.05)，復(fù)方青黛顆粒組（103.93±7.27vs80.49±6.68，P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5、結(jié)腸粘膜組織IL-1β含量檢測(cè):實(shí)驗(yàn)結(jié)束后結(jié)腸粘膜組織IL-1β含量與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組結(jié)腸粘膜IL-1β水平明顯升高(148.93±10.77 vs38.93±8.23，P＜0.01)，與模型對(duì)照組比較，中西醫(yī)結(jié)合組降低IL-1β最為明顯（63.91±5.

11、81vs148.93±10.77，P＜0.01)，SASP組(81.72±3.74vs148.93±10.77，P＜0.01)和復(fù)方青黛顆粒組(85.84±6.95vs148.93±10.77，P＜0.01)亦有明顯下降;SASP組與復(fù)方青黛顆粒組比較(81.72±3.74vs85.84±6.95，P=0.225)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與中西醫(yī)結(jié)合組比較，SASP組(81.72±3.74vs63.91±5.81，P＜0.05)，復(fù)方青黛顆

12、粒組(85.84±6.95vs63.91±5.81，P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。6、結(jié)腸粘膜組織IL-4含量檢測(cè):實(shí)驗(yàn)結(jié)束后結(jié)腸粘膜組織IL-4含量與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組結(jié)腸粘膜IL-4水平明顯下降(81.88±6.68vs142.59±8.01，P＜0.01);與模型對(duì)照組比較，中西醫(yī)結(jié)合組升高IL-4明顯（130.63±9.80vs81.88±6.68，P＜0.01），SASP組(114.01±10.37vs81.88

13、±6.68，P＜0.01)和復(fù)方青黛顆粒組(109.90±10.09vs81.88±6.68，P＜0.01)亦有升高;SASP組與復(fù)方青黛顆粒組比較(114.01±10.37vs109.90±10.09，P=0.317)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與中西醫(yī)結(jié)合組組比較，SASP組(114.01±10.37vs130.63±9.80，P＜0.01)，復(fù)方青黛顆粒組(109.90±10.09vs130.63±9.80，P＜0.01)，差異具有顯著統(tǒng)

14、計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:1、在TNBS/乙醇誘導(dǎo)的大鼠UC模型中，CRP能夠靈敏及客觀的反映疾病的病情狀態(tài)、治療效果及進(jìn)行預(yù)后判斷;2、促炎細(xì)胞因子IL-1β及TNF-α的生成增加和抗炎細(xì)胞因子IL-4的減少在UC的形成及病理變化中起著重要的作用，抑制促炎細(xì)胞因子IL-1β及TNF-α的生成和促進(jìn)抗炎細(xì)胞因子IL-4的表達(dá)增加能夠有效治療UC及抑制其病理變化，促進(jìn)UC痊愈，是有效阻斷或減輕UC病理改變的主要途徑之一;3、SASP組和

15、復(fù)方青黛顆粒組均能一定程度的改善結(jié)腸組織學(xué)評(píng)分，降低促炎細(xì)胞因子IL-1β和TNF-α水平及升高抗炎細(xì)胞因子IL-4的水平，從而有效治療TNBS/乙醇誘導(dǎo)的大鼠UC，且兩者療效相當(dāng)，差異無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與既往研究結(jié)果不一致;4、復(fù)方青黛顆粒聯(lián)合柳氮磺胺嘧啶的中西醫(yī)結(jié)合療法較單獨(dú)SASP、復(fù)方青黛顆粒能夠更加有效地改善UC大鼠的組織學(xué)評(píng)分、逆轉(zhuǎn)結(jié)腸粘膜組織病理改變，抑制促炎細(xì)胞因子IL-1β及TNF-α的生成和促進(jìn)抗炎細(xì)胞因子IL-4的