豐富環(huán)境對腦梗死大鼠曠場、水迷宮行為學(xué)及Nogo-A蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、【背景】缺血性卒中是發(fā)生率高、致殘率高、死亡率高的一項常見疾病。如何對卒中患者進行有效的神經(jīng)功能康復(fù)，是一個富有意義的課題。國內(nèi)外多項研究表明豐富環(huán)境可促進腦梗死動物及患者神經(jīng)功能的康復(fù)。豐富環(huán)境可提高實驗動物的運動功能、學(xué)習(xí)記憶能力、社交能力。神經(jīng)元在分化成熟后再生能力大大下降，但在受到損傷后可表現(xiàn)出一定的再生能力或神經(jīng)元結(jié)構(gòu)可塑性變化。成熟神經(jīng)元的再生能力不足，主要是由于神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)存在廣泛的神經(jīng)再生抑制。因此為了探討豐富環(huán)境促進缺血

2、性卒中康復(fù)是否通過誘導(dǎo)軸突生長抑制蛋白表達(dá)下調(diào)而發(fā)揮作用。本課題制作了局部缺血性卒中實驗動物模型，通過豐富環(huán)境對其進行干預(yù)，在干預(yù)的不同時間點評估實驗動物的神經(jīng)功能（主要是運動動能和學(xué)習(xí)記憶功能），以探討干預(yù)時間長短對其神經(jīng)功能康復(fù)的影響。在豐富環(huán)境干預(yù)結(jié)束后行免疫組化，觀察梗死灶及梗死灶對側(cè)神經(jīng)生長抑制蛋白的表達(dá)，以探討豐富環(huán)境能否誘導(dǎo)解除神經(jīng)再生抑制。
　　【目的】探討豐富環(huán)境對腦梗死大鼠運動能力、焦慮狀況、學(xué)習(xí)記憶的影響。觀

3、察豐富環(huán)境對腦梗死周圍區(qū)域、腦梗死灶等位對側(cè)區(qū)Nogo-A蛋白表達(dá)的作用。研究豐富環(huán)境對實驗動物行為學(xué)改變和Nogo-A蛋白表達(dá)量之間的關(guān)系。闡明豐富環(huán)境對腦卒中的康復(fù)價值。
　　【方法】將大腦中動脈線栓模型鼠置于豐富環(huán)境中，經(jīng)28天干預(yù)后用行為學(xué)方法觀察其運動功能、學(xué)習(xí)記憶、焦慮狀況。用曠場實驗觀察其單位時間的運動路程來反應(yīng)其運動能力，記數(shù)單位時間排糞便顆粒數(shù)和其穿越中心區(qū)域的百分比來反應(yīng)其焦慮狀況。水迷宮實驗中實驗鼠尋找平臺前

4、的潛伏期長短、穿越平臺區(qū)的次數(shù)可以反應(yīng)其學(xué)習(xí)記憶能力。行為學(xué)觀察之后灌注取腦觀察腦梗塞周圍、腦梗塞對側(cè)區(qū)域Nogo-A蛋白表達(dá)陽性細(xì)胞數(shù)。
　　【結(jié)果】
　　1、曠場實驗中，標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境組、豐富環(huán)境組各時點的運動總路程S小于假手術(shù)組各時點的運動總路程，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。豐富環(huán)境組在7d、14d的運動總路程與標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境組相應(yīng)時間點的運動總路程比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。豐富環(huán)境組28d的運動路程大于標(biāo)準(zhǔn)環(huán)

5、境組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。假手術(shù)組14d曠場實驗運動總路程較7d增加，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），但28d曠場實驗運動總路程與14d相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　2、曠場實驗中，不同時間點的大鼠運動路徑中央?yún)^(qū)占總路徑比率（％）各組間比較，差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。不同時間點的大鼠排便顆粒，各組間比較差異并無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　3、在定位航行實驗中，標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境組、豐

6、富環(huán)境組各時間點的潛伏期均長于相應(yīng)時間點假手術(shù)組（P<0.05）。豐富環(huán)境組在7d的潛伏期與標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），而在14d、28d的潛伏期均小于標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　4、在空間探索實驗中，標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境組各時點穿越平臺次數(shù)均少于假手術(shù)組，兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；豐富環(huán)境組在28d的穿越平臺次數(shù)多于標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
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7、、假手術(shù)組、標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境組、豐富環(huán)境組大鼠梗死灶周圍均可見少突膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)的Nogo-A陽性細(xì)胞表達(dá)。標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境組梗死灶周圍Nogo-A陽性細(xì)胞的表達(dá)較假手術(shù)組增多，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；豐富環(huán)境組梗死灶周圍Nogo-A陽性細(xì)胞的表達(dá)較標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境組減少，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境組、豐富環(huán)境組梗死灶對側(cè)Nogo-A陽性細(xì)胞數(shù)與假手術(shù)組比較差異無統(tǒng)計意義（P>0.05）。
　　【結(jié)論】
　　1、豐富環(huán)境