二氫青蒿素抑制BGC-823胃癌細(xì)胞增殖及轉(zhuǎn)移的研究.pdf

1、本文主要從以下幾個(gè)方面進(jìn)行了論述：
　　第一部分：二氫青蒿素抑制胃癌細(xì)胞株BGC-823增殖及其機(jī)制的影響
　　目的:在體外細(xì)胞水平及活體動(dòng)物水平探討DHA對人胃癌細(xì)胞株BGC-823增殖、細(xì)胞周期、凋亡等生物學(xué)表型的影響，并初步探討其分子機(jī)制。
　　方法:采用MTT法檢測DHA、5氟尿嘧啶(5-FU)對BGC-823細(xì)胞的殺傷作用;流式細(xì)胞術(shù)檢測DHA對BGC-823細(xì)胞周期與凋亡的影響;Western blot檢測

2、細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表達(dá);分光光度方法檢測Caspase-3活性。建立裸鼠胃癌動(dòng)物模型評估DHA在活體水平對胃癌的治療效果。
　　結(jié)果:與對照組相比，不同濃度DHA(10、20、40μmol/L)均能顯著抑制BGC-823胃癌細(xì)胞的體外增殖。小劑量DHA（10μmol/L）可與5-FU協(xié)同殺傷胃癌細(xì)胞，促進(jìn)5-FU的細(xì)胞毒效應(yīng);與5-FU單藥組相比，聯(lián)合用藥組的細(xì)胞存活率顯著下降，5-FU殺

3、傷BGC-823的半數(shù)抑制率濃度(IC50)=3.04μg/mL，而聯(lián)合用藥組的IC50下降為1.42μg/mL。細(xì)胞周期和凋亡分析顯示，DHA可以使BGC-823細(xì)胞在G2/M期發(fā)生阻滯，并可誘導(dǎo)BGC-823凋亡。 DHA處理BGC-823細(xì)胞后，抗凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)顯著下調(diào)，促凋亡蛋白Bax和Caspase-3表達(dá)顯著上調(diào)。DHA能夠顯著抑制裸鼠皮下胃癌移植瘤的生長，并誘導(dǎo)其細(xì)胞凋亡。
　　結(jié)論:DHA能夠顯著抑制胃癌細(xì)

4、胞的增殖，阻滯細(xì)胞周期進(jìn)程，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，并能增加BGC-823細(xì)胞對5-FU的敏感性，其機(jī)理可能與下調(diào)Bcl-2表達(dá)，上調(diào)Bax表達(dá)有關(guān)。
　　第二部分：二氫青蒿素對BGC-823胃癌細(xì)胞侵襲及轉(zhuǎn)移能力的影響及其機(jī)制的研究
　　目的:二氫青蒿素是青蒿素的一種衍生物，具有較為廣泛的抗腫瘤活性。本課題研究DHA對人胃癌細(xì)胞株BGC-823體外遷移、粘附、侵襲能力及活體腫瘤轉(zhuǎn)移能力的影響并初步探討其分子機(jī)制。
　　方法:采

5、用Transwell小室技術(shù)檢測DHA對胃癌細(xì)胞BGC-823細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響，黏附實(shí)驗(yàn)檢測DHA作用后細(xì)胞黏附能力的變化。實(shí)時(shí)定量RT-PCR方法和酶聯(lián)免疫分析法分別檢測VEGF mRNA和蛋白的表達(dá)水平。采用尾靜脈注射方式建立裸鼠胃癌肺轉(zhuǎn)移模型，采用DHA灌胃方式研究DHA對裸鼠胃癌轉(zhuǎn)移的影響。
　　結(jié)果:與對照組相比，DHA（20、40μmol/L）處理組BGC-823胃癌細(xì)胞的體外遷移、粘附、侵襲能力均顯著降低(P