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1、第一部分 工頻電磁場(chǎng)暴露對(duì)胚胎鼠眼晶狀體遺傳毒性的影響 目的: 工頻電磁場(chǎng)為“可疑致癌物質(zhì)”,隨著高壓線路及家庭常用電器的增多,其對(duì)人類(lèi)健康的危害越來(lái)越受到關(guān)注。國(guó)際非電離輻射防護(hù)委員會(huì)(ICNIRP)制定工頻電磁場(chǎng)公眾暴露限值為0.1 mT。本研究采用該限值15倍及45倍極大強(qiáng)度的工頻電磁場(chǎng)暴露,探索其是否對(duì)胚胎鼠眼晶狀體的發(fā)育產(chǎn)生遺傳毒性影響。 方法: 采用頻率50 Hz、磁通密度0 mT、1.5 mT、
2、4.5 mT的電磁場(chǎng),在BALB/c小鼠孕0~18天輻照3小時(shí)厭,孕18天取胚胎鼠眼晶狀體,每組保留1只孕鼠至幼鼠出生后2周,顯微鏡下觀察各組晶狀體及出生后2周幼鼠晶狀體的透明度,電鏡觀察胚胎鼠眼晶狀體上皮細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu),各組胚胎鼠眼晶狀體行水溶性蛋白、水不溶性蛋白測(cè)定,Real-time PCR檢測(cè)各組胚胎鼠眼晶狀體Pax6、Soxl、Proxl、c-mafmRNA表達(dá)水平,ANOVA分析?! 〗Y(jié)果: 同0 mT電磁場(chǎng)暴
3、露后的胚胎鼠眼晶狀體相比,1.5 mT、4.5 mT組胚胎鼠眼晶狀體透明,各組出生后2周幼鼠晶狀體均透明。同0 mT組相比,1.5mT、4.5mT組胚胎鼠眼晶狀體上皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)無(wú)明顯改變,水不溶性蛋白/總蛋白比值各組差異無(wú)顯著性(p>0.05),各組Pax6、Soxl、Proxl、c-mafmRNA表達(dá)水平差異無(wú)顯著性(p>0.05)。 結(jié)論: 極大強(qiáng)度的1.5 mT、4.5 mT工頻電磁場(chǎng)暴露未能對(duì)胚胎鼠眼晶狀體的發(fā)
4、育產(chǎn)生影響。研究結(jié)果提示日常生活中的工頻電磁場(chǎng)暴露未能對(duì)晶狀體發(fā)育產(chǎn)生遺傳毒性。 第二部分 急性手機(jī)微波輻射對(duì)人眼晶狀體上皮細(xì)胞HSP及MAPKs蛋白表達(dá)水平的影響 目的: 檢測(cè)不同劑量手機(jī)頻段微波(1.8 GHz)急性輻照體外培養(yǎng)的人晶狀體上皮細(xì)胞(human lens epithelial cells,hLECs)后,是否影響細(xì)胞內(nèi)熱休克蛋白(heat shock protein, HSP)27、HSP70、
5、HSP90在蛋白質(zhì)水平的表達(dá)量,是否激活細(xì)胞內(nèi)絲裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPKs)信號(hào)通路,以探討細(xì)胞抗應(yīng)激損傷的反應(yīng)情況?! 》椒ǎ后w外培養(yǎng)hLECs,分為輻照組和假照組,置于sXc-1800細(xì)胞輻照系統(tǒng)(發(fā)射217Hz脈沖調(diào)制的1.8GHz微波)內(nèi)連續(xù)波輻照2小時(shí),輻照強(qiáng)度(specific absorption rate,SAR)分別為1、2、3、4 W/kg,假照
6、組為0 W/kg,輻照后Western-blot免疫印跡法檢測(cè)hLECs內(nèi)HSP27、HSP70和HSP90在蛋白質(zhì)水平表達(dá)量的變化。在HSP檢測(cè)結(jié)果的基礎(chǔ)上,將體外培養(yǎng)的hLECs分為輻照組和假照組,分別連波輻照5、15、30、60、120分鐘,輻照強(qiáng)度分別為2、3、4W/kg,假照組為0 W/kg,輻照后Westem-blot免疫印跡法檢測(cè)hLECs內(nèi)總體及磷酸化的MAPKs蛋白在蛋白質(zhì)水平表達(dá)量的變化。 結(jié)果:
7、 各組hLECs都可檢測(cè)到HSP的表達(dá)。與假照組相比,2、3、4W/kg的手機(jī)微波輻照2小時(shí)可引起HSP27、HSP70蛋白量表達(dá)的增強(qiáng),但三組間表達(dá)量差異無(wú)顯著性(p>0.05),HSP90蛋白量表達(dá)不增強(qiáng)。與假照組相比,2、3、4W/kg的手機(jī)微波輻照5分鐘即可引起hLECs中ERK1/2磷酸化,并在30分鐘時(shí)達(dá)到高峰;輻照120分鐘可引起JNK1/2磷酸化;而p38不被激活。 結(jié)論: 非應(yīng)激狀態(tài)下人晶狀體上皮細(xì)胞
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