4-苯基丁酸抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、治療脊髓損傷的基礎(chǔ)研究.pdf

1、背景：
　　 脊髓損傷(spinalcordinjury，SCI)是嚴(yán)重危害人類健康的疾病，損傷常導(dǎo)致?lián)p傷平面以下運(yùn)動(dòng)及感覺功能不完全或完全喪失。我們的前期研究證實(shí)：脊髓損傷時(shí)神經(jīng)元凋亡可能與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激有關(guān)，并且強(qiáng)烈的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激可能是糖尿病人預(yù)后較差的原因。
　　 目的：
　　 本實(shí)驗(yàn)將在前期研究的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步探討化學(xué)分子伴侶、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激特異性阻斷劑4-苯基丁酸鈉(4-phenylbutyrateacid，4-

2、PBA)能否通過減輕內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，保護(hù)脊髓組織，改善脊髓損傷預(yù)后。
　　 方法：
　　 45只健康SD大鼠隨機(jī)分為三組：假手術(shù)對(duì)照組(n=15，只作全椎板切除不做脊髓打擊)，脊髓損傷對(duì)照組(n=15，生理鹽水治療組)、脊髓損傷實(shí)驗(yàn)組(n=15，4-PBA治療組)，實(shí)驗(yàn)組采用Allen法(weightdropdevice)制作T10急性脊髓損傷模型。術(shù)前及傷后一周應(yīng)用BBB評(píng)分法評(píng)價(jià)其神經(jīng)功能。術(shù)后24h、7d，HE染色觀察

3、脊髓病理變化；熒光定量PCR和免疫組織化學(xué)染色(IHC)檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志分子Chop和Grp78的表達(dá)變化。
　　 結(jié)果：
　　 ①BBB評(píng)分：手術(shù)后，假手術(shù)組大鼠運(yùn)動(dòng)自如，未出現(xiàn)任何功能障礙，脊髓損傷組大鼠均出現(xiàn)嚴(yán)重運(yùn)動(dòng)功能障礙，BBB功能評(píng)分為0-2分不等，但兩脊髓損傷組之間沒有顯著性差異(P>0.05)；
　　 ②HE染色：脊髓前腳神經(jīng)元出現(xiàn)不同程度細(xì)胞濃縮、胞質(zhì)嗜酸性交、核濃縮、碎裂、溶解等細(xì)胞凋亡表現(xiàn)

4、。脊髓損傷4-PBA治療組與生理鹽水對(duì)照組相比，凋亡神經(jīng)元數(shù)量有顯著性差異(P<0.05)；
　　 ③熒光定量PCR顯示，4-PBA可顯著減少內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號(hào)分子Chop和Grp78mRNA的表達(dá)(P<0.01)；
　　 ④免疫組織化學(xué)染色顯示，Chop和Grp78陽性細(xì)胞數(shù)顯著減少(P<0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 4-PBA治療可顯著減輕內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激導(dǎo)致的脊髓損傷。作為一種已經(jīng)被批準(zhǔn)用來治療尿素循環(huán)障