油松花粉多糖分離純化及抗氧化活性研究.pdf

1、油松花粉多糖具有抗腫瘤、增強(qiáng)免疫等功能。課題以華北承德地區(qū)的油松花粉為原料，對(duì)其中的花粉活性多糖的提取工藝進(jìn)行研究；苯酚-硫酸法測(cè)定花粉多糖含量的顯色條件進(jìn)行優(yōu)化；采用DEAE-纖維素52柱層析、Sephacryl S-200凝膠柱層析對(duì)花粉多糖進(jìn)行分離和純化；運(yùn)用Sephacryl S-300凝膠柱層析進(jìn)行純度鑒定；運(yùn)用紅外光譜分析、紫外掃描分析對(duì)花粉多糖的結(jié)構(gòu)進(jìn)行初步研究；通過(guò)體外清除超氧陰離子自由基和羥基自由基研究油松花粉多糖的抗

2、氧化活性。主要的研究結(jié)果如下：
　　 (1)以葡萄糖為對(duì)照，優(yōu)選苯酚-硫酸法測(cè)定油松花粉多糖含量的顯色條件。最佳顯色條件為：取待測(cè)油松花粉多糖2mL，加入濃度為5％苯酚1mL，迅速滴加濃硫酸6.0mL，.搖勻后于沸水浴中放置10min，在483nm處測(cè)定吸光度值。
　　 (2)對(duì)油松花粉的水提工藝進(jìn)行了研究，探討提取溫度、提取時(shí)間、料液比和提取次數(shù)對(duì)多糖提取率的影響。在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，通過(guò)正交試驗(yàn)確定最佳提取工藝條件

3、。結(jié)果表明浸提溫度對(duì)多糖提取率的影響最大，其次為料液比、提取次數(shù)，浸提時(shí)間的影響最小。油松花粉多糖的最佳提取工藝條件為：提取溫度為70℃，料液比為1:12，提取時(shí)間為2h，提取次數(shù)為3次。在此提取條件下，松花粉多糖的得率為1.81％。
　　 (3)用DEAE-纖維素52對(duì)油松花粉精制多糖進(jìn)行初步分離，主要得到D1和D3兩個(gè)組分。再用Sephaeryl S-200凝膠柱色譜分別對(duì)多糖D1和D3進(jìn)一步分離純化得到兩種均一組分D11和

4、D31。經(jīng)過(guò)Sephaeryl S-300凝膠柱色譜進(jìn)行純度鑒定，表明D11和D31是均一多糖。采用用凝膠過(guò)濾法測(cè)定D11分子量為76468。UV檢測(cè)顯示油松花粉多糖D11于280nm處未見(jiàn)有核酸和蛋白特征吸收峰，經(jīng)IR檢測(cè)證實(shí)多糖D11具有多糖類(lèi)物質(zhì)的特征吸收峰。
　　 (4)油松花粉多糖粗多糖、精制多糖對(duì)O2-·自由基和·OH自由基均有一定的清除作用，并且隨著多糖濃度的增大清除效果增強(qiáng)。油松花粉精制多糖的作用效果大于油松花粉