孔雀石綠-核酸探針檢測尿中腺苷的新方法研究.pdf

1、尿中腺苷(Adenosine)可以作為癌癥或其他疾病潛在的生物標(biāo)志物，研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞的快速增殖可導(dǎo)致腺嘌呤核苷酸降解，從而使腺苷的產(chǎn)生和排出增多，這又促進(jìn)腫瘤的快速生長，使腺苷在體內(nèi)蓄積。另外，腺苷是一種重要的內(nèi)源活性物質(zhì)，在外周和中樞神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)起重要作用。因此，檢測尿中腺苷的含量對惡性腫瘤的早期診斷、預(yù)后監(jiān)測等方面具有實(shí)際意義。
　　第二章，建立一種非標(biāo)記孔雀石綠-核酸探針共振光散射法檢測尿中腺苷的新方法

2、。設(shè)計(jì)的核酸探針呈發(fā)夾結(jié)構(gòu)，在腺苷存在的條件下，腺苷與核酸探針的適體部分結(jié)合，核酸探針的構(gòu)象發(fā)生改變，生成帶有單鏈DNA片段的G-四聚體結(jié)構(gòu)，它與孔雀石綠結(jié)合后使體系的共振光散射強(qiáng)度增強(qiáng)。固定已優(yōu)化條件，腺苷濃度在7.5×10-11~2.2×10-9mol·L-1范圍與ΔI呈良好的線性關(guān)系，線性方程為?I=18.9c(×10-10mol·L?1)+16.5，r=0.9975，檢出限為2.3×10-11mol·L-1。該方法操作簡便，靈敏

3、度高，已用于尿樣中腺苷的檢測。
　　第三章，基于核酸探針構(gòu)象轉(zhuǎn)變形成具有部分單鏈DNA的G-四聚體結(jié)構(gòu)，它與孔雀石綠作用，使體系的吸光度增強(qiáng)，據(jù)此建立了分光光度法檢測尿中腺苷的新方法。腺苷濃度在5.2×10-10~1.8×10-8mol·L-1范圍與A/A0呈良好的線性，線性方程為A/A0=1.04c(×10-7mol·L-1)+1.04，r=0.9976，檢出限為1.6×10-10mol·L-1。該方法簡便、快速，選擇性好，沒有