人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞抑制小鼠同種異基因骨髓移植中aGVHD的初步研究.pdf

1、目的：研究小鼠同種異基因骨髓移植中過(guò)繼性輸注人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（HUCMSCs）對(duì)急性移植物抗宿主病（aGVHD）的抑制作用。
　　 方法：本研究采用了一種新的分離HHCMSCs的方法，經(jīng)膠原酶Ⅱ?qū)θ四殠ЫM織消化2h得到比較混雜的細(xì)胞，傳代至P3后細(xì)胞為較純的HUCMSCs。HHCMSCs與CFSE標(biāo)記的CD4+CD25-T細(xì)胞共培養(yǎng)，流式測(cè)定CD4+CD25-T細(xì)胞的增殖情況。建立C57BL/6→DBA/2小鼠aGVHD模型，

2、即aGVHD組。在此模型基礎(chǔ)上，過(guò)繼性輸注HUCMSCs，即為HUCMSCs治療組。對(duì)兩組受鼠的體重、生存情況、相關(guān)病理學(xué)檢查、淋巴細(xì)胞亞群、血清中的細(xì)胞因子進(jìn)行比較。
　　 結(jié)果：HUCMSCs在重組人IFN-γ的刺激下能夠顯著地抑制CD4+CD25-T細(xì)胞的增殖，且這一作用是通過(guò)IDO介導(dǎo)的。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，過(guò)繼性輸注HUCMSCs后受鼠aGVHD各項(xiàng)病癥明顯減輕，生存期顯著延長(zhǎng)。另外，通過(guò)對(duì)血清中細(xì)胞因子的測(cè)定發(fā)現(xiàn)，在移植后

3、第7d，實(shí)驗(yàn)組IFN-γ、IL-12分泌量顯著高于aGVHD組；而IL-4水平無(wú)顯著性差異。而且發(fā)現(xiàn)過(guò)繼性輸注HUCMSCs后第21dCD3+NK1.1+NKT細(xì)胞較第7d升高。
　　 結(jié)論：IFN-γ能夠通過(guò)IDO的表達(dá)增強(qiáng)小HUCMSCs在體外的免疫抑制功能，過(guò)繼性輸注HUCMSCs能夠抑制小鼠同種異基因骨髓移植后出現(xiàn)的aGVHD。這些為體外擴(kuò)增的HUCMSCs抑制aGVHD作用機(jī)理的研究及HUCMSCs細(xì)胞療法的臨床運(yùn)用提