同種異體與同基因骨髓間充質干細胞（MSC）體內移植免疫反應的比較研究.pdf

1、目的：比較同種同基因與同種異基因骨髓間充質干細胞(MSC)體內移植的免疫反應，通過比較兩者間的差異來研究同種異體骨髓間充質干細胞皮下移植是否存在免疫反應，探討骨髓間充質干細胞異體移植的可能性。 方法：分別取6周齡BALB/C品系小鼠和轉EGFP基因的C75BL\6品系小鼠的骨髓，應用全骨髓培養(yǎng)+差速貼壁分離法獲取骨髓間充質干細胞，經穩(wěn)定傳代至第五代后，以相同的濃度融入藻酸鈉溶液中，構建MSC—藻酸鈣復合物，植入BALB/C品系小

2、鼠背部皮下，另單純藻酸鈣植入作為陰性對照。分別于1．2．4．8周取小鼠外周血行流式細胞儀檢測T淋巴細胞亞群變化，同時將小鼠背部植入物取出，做冰凍切片，行HE及CD4、CD8抗原免疫組化染色，觀察植入物內T淋巴細胞亞群的變化，帶有GFP蛋白的細胞組切片在熒光顯微鏡下觀察并計數(shù)存活細胞數(shù)。 結果：流式細胞儀檢測MSCs表達MHC-Ⅰ類分子，不表達MHC-Ⅱ類分子及CD40、B7(CD80/CD86)等T細胞活化的協(xié)同信號分子。外周血

3、T淋巴細胞亞群分析：P、G組血標本各時間段CD4<'+>/CD8<'+>比值及CD4<'+>值無差異，1周及4周CD8<'+>值無差異，2周時G組CD8<'+>高于P組(P<0.05)。免疫組化檢查顯示試驗組1、2周時標本可見CD4<'+>，CD8<'+>細胞少量表達，以2周時較為明顯，4周時明顯減少，8周時基本消失，同種異體與同種同基因組淋巴細胞亞群變化無顯著差異。熒光顯微鏡下見表達GFP蛋白的MSCs隨著植入時間的增加逐漸減少，初期