內(nèi)皮細胞來源的微囊泡促進腹膜樣組織血管化的研究.pdf

1、目的：
　　研究臍靜脈內(nèi)皮細胞來源的微囊泡能否促進大鼠來源的腹膜間皮細胞的增殖及使組織工程的腹膜樣組織血管化增強的可能性。
　　方法：
　?。?）采用I型膠原酶消化獲得人臍靜脈內(nèi)皮細胞，無血清應(yīng)激刺激臍靜脈內(nèi)皮細胞放微囊泡，同時收集微囊泡并對微囊泡行透射電鏡檢測和流式細胞術(shù)表面marker鑒定。（2）在體外試驗中，大鼠來源的腹膜間皮細胞（PMC）與臍靜脈內(nèi)皮細胞來源微囊泡共培養(yǎng)，對PMC及細胞上清培養(yǎng)液液分別行CCK8

2、、RT-PCR和ELISA檢測。（3）在體內(nèi)試驗中，腹膜間皮細胞種植在小腸粘膜下層的表面，實驗組為加入了微囊泡而對照組未加微囊泡，預(yù)培養(yǎng)一周后將復(fù)合物移植入裸鼠皮下，2周后取出裸鼠皮下的腹膜樣組織行HE染色檢測。
　　結(jié)果：
　　通過透射電鏡可以看到人臍靜脈內(nèi)皮細胞來源的微囊泡，大小形狀不一。流式細胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)微囊泡表達 CD105、CD29，而 CD45未見表達。同時在加入微囊泡的實驗組在體外與對照組相比能明顯促進腹膜間皮

3、細胞（PMC）增殖（p<0.05）,加入微囊泡的實驗組中VEGF濃度明顯高于對照組（p<0.05）。并同時對兩組腹膜間皮細胞行VEGF的mRNA表達情況行RT-PCR檢測，發(fā)現(xiàn)加入微囊泡的實驗組比對照組的表達是增高的。對皮下移植2周后取出的復(fù)合物染色顯示，加微囊泡的實驗組比對照組新生的微血管樣結(jié)構(gòu)的數(shù)量是明顯增多的（p<0.05）。
　　結(jié)論：
　　我們證實了人臍靜脈內(nèi)皮細胞來源的微囊泡能夠促進大鼠來源的腹膜間皮細胞增殖，刺