逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的分泌性人核糖核酸酶抑制因子對小鼠黑色素瘤基因治療的研究.pdf

1、大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的分泌性人核糖核酸酶抑制因子對小鼠黑色素瘤基因治療的研究姓名：盛甫秀申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：崔秀云20050601并且外源性限制血管的生成可以明顯地抑制腫瘤的生長，甚至可以使腫瘤消退。因此Folkman從其開創(chuàng)性的研究中提出假說認(rèn)為，阻斷腫瘤的血管形成就可以阻止腫瘤的生長。至今為止，已有很多的血管阻斷劑被發(fā)現(xiàn)。但應(yīng)用這些阻斷劑～個明顯的不足是需要高濃度的阻斷劑才可以有效

2、地抑制腫瘤的生長，而這些阻斷劑又因?yàn)閺?fù)雜的提取過程，在應(yīng)用上受到限制?；蛑委熆梢栽谝欢ǔ潭壬辖鉀Q這個問題。所謂基因治療是指，用一定的方法將外源基因?qū)肽康募?xì)胞中，使之在體內(nèi)長期進(jìn)行表達(dá)，從而達(dá)到治療的目的。目前，基因治療的導(dǎo)入系統(tǒng)可分為兩類：病毒載體系統(tǒng)和非病毒載體系統(tǒng)?，F(xiàn)在有相當(dāng)多的基因治療臨床項(xiàng)目是采用前者中的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體。本文所用的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體pLNCX有來源于鼠莫氏白血病病毒和鼠莫氏肉瘤病毒的長末端重復(fù)序列(LTR)及巨細(xì)

3、胞病毒即早啟動子(PcMv)和一個新霉素篩選標(biāo)記(neo)。該載體質(zhì)粒一旦被轉(zhuǎn)染入包裝細(xì)胞系PA317即可被其表達(dá)的逆轉(zhuǎn)錄病毒外殼蛋白所包裝，從而形成有感染力，卻復(fù)制缺陷型的逆轉(zhuǎn)錄病毒顆粒?？寡苌蓪⑹且环N抑制腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移的有效方法。動物試驗(yàn)顯示RI能抑制動物體內(nèi)某些移植實(shí)體瘤的生長，給予荷瘤小鼠RI后可以抑制乳腺癌實(shí)體瘤Ca761，肉瘤S180，肝癌實(shí)體瘤H22，C6大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤等的生長。我們以前的實(shí)驗(yàn)也顯示RI在腫瘤病人的血

4、中活性下降，并且RIrrlRNA在乳腺癌中比其在正常組織中顯著降低。RI由含有許多亮氨酸的重復(fù)順序的多肽組成，含有這樣重復(fù)順序的一百多種蛋白質(zhì)顯示了廣泛的功能，包括細(xì)胞周期調(diào)節(jié)、DNA修復(fù)、對細(xì)胞外基質(zhì)相互作用以及抑制酶活性等。RI被認(rèn)為是胚胎發(fā)育、創(chuàng)傷愈合及腫瘤發(fā)生中新血管形成的一種調(diào)節(jié)因子。RI定位于染色體的llDl55，與_raS基因鄰近，在腫瘤病人中經(jīng)常存在染色體的1113155部位的變異。RI可能與細(xì)胞的生長和分化有關(guān)。因此，