右旋美托咪啶抑制P38MAPK-NF-κB信號途徑減輕大鼠內(nèi)毒素性急性肺損傷.pdf

1、目的：觀察右旋美托咪啶對內(nèi)毒素誘導(dǎo)的急性肺損傷大鼠肺組織中P38MAPK活化及炎癥反應(yīng)的影響，并探討右旋美托咪啶肺保護(hù)作用的P38MAPK/NF-κB信號通路機(jī)制。
　　方法：健康成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為7組:生理鹽水組(Control)(n=10)、內(nèi)毒素組(LPS)(n=40)、0.2μg/kg/h右旋美托咪啶處理組(Dex0.2)(n=20)、1μg/kg/h右旋美托咪啶處理組(Dex1)(n=20)、5μg/kg/h右旋美

2、托咪啶處理組(Dex5)(n=20)、5μg/kg/h右旋美托咪啶與育亨賓聯(lián)合處理組(Dex5+Yo)(n=20)和育亨賓處理組(Yo)(n=20)。LPS組按照不同的時間點又被分為1、3、6、9h四個亞組，Dex0.2組、Dex1組、Dex5組以及Dex5+Yo組、Yo組按照不同的時間點又分別被分為1、6h兩個亞組。LPS組腹腔注射LPS8mg/kg(1.6mg/ml)制作內(nèi)毒素性急性肺損傷模型。右旋美托咪啶各處理組先給予1μg/kg

3、/h負(fù)荷劑量10分鐘，隨后在腹腔注射LPS后持續(xù)泵注相應(yīng)劑量右旋美托咪啶至實驗結(jié)束。Control組與LPS組持續(xù)泵注等體積的生理鹽水（1ml/kg/h）。育亨賓在給予右旋美托咪啶負(fù)荷劑量后以及LPS注射后3小時，分別給予0.1 mg/kg靜注。利用Western blot方法檢測大鼠肺組織中p38絲裂原激活的蛋白激酶(p38MAPK)和磷酸化水平、核因子κB(NF-κB)以及NF-κB抑制蛋白(IκBα)的表達(dá)。酶聯(lián)免疫吸附(ELIS

4、A)法檢測支氣管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α和IL-10的濃度。測定并計算動脈血氣和肺濕/干重比，觀察肺組織病理學(xué)變化。
　　結(jié)果：與Control組相比，LPS注射后1、3、6、9h肺組織中p38MAPK的磷酸化程度、肺組織細(xì)胞核中NF-κB的表達(dá)、BALF中TNF-α和IL-10的濃度均明顯增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)，并分別于1h、6h、3h、6h達(dá)最大值。LPS組病理組織學(xué)檢查顯示肺組織結(jié)構(gòu)明顯破壞，肺間質(zhì)

5、水腫，肺泡萎陷，大量的炎性細(xì)胞浸潤;肺組織的濕/干重比明顯的高于Control組(5.4±0.3 vs3.6±0.2，p＜0.05);動脈氧分壓較基礎(chǔ)值明顯降低(p＜0.05)。5μg/kg/h右旋美托咪啶處理組肺組織病理學(xué)的改變明顯改善，肺組織濕/干重比、磷酸化的p38 MAPK、NF-κB表達(dá)、支氣管肺泡灌洗液中TNF-α和IL-10水平明顯低于LPS組(p＜0.05)。與LPS組比較，育亨賓處理組p38MAPK的磷酸化程度、NF-