微波固相合成醋酸亮丙瑞林——新型固相多肽合成反應(yīng)器研制及應(yīng)用.pdf

1、多肽是涉及生物體內(nèi)各種細(xì)胞功能的生物活性分子，多肽藥物具有獨特的優(yōu)越性，因此近年來備受國內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注。隨著多肽藥物化學(xué)的飛速發(fā)展，為滿足科研與生產(chǎn)的需求，如何快速高效地獲得多樣性結(jié)構(gòu)的多肽產(chǎn)物成為備受關(guān)注的焦點。然而其中一些關(guān)鍵技術(shù)問題仍然沒有得到很好解決，諸如反應(yīng)溶劑的選擇，困難序列的縮合，固相多肽合成反應(yīng)器的效能提高，合成策略的優(yōu)化組合等。本論文旨在設(shè)計一新型的固相多肽合成反應(yīng)器，有效地與微波反應(yīng)系統(tǒng)耦合，改善了困難序列縮合問題，

2、改進(jìn)醋酸亮丙瑞林多肽固相合成工藝及提高其總體合成效率。本論文通過實驗和理論分析得到了以下主要結(jié)果：
　　 (1)與傳統(tǒng)固相肽合成反應(yīng)器比較，自行設(shè)計的固相肽合成小試反應(yīng)器能有效地與微波反應(yīng)系統(tǒng)相耦合，集成反應(yīng)、磁力攪拌、控溫、鼓泡、氮氣保護(hù)、過濾和干燥除水多重功能，改善了傳統(tǒng)多肽合成中的困難反應(yīng)反應(yīng)慢、原料用量多、縮合效率低的問題，氮氣鼓泡加上磁力攪拌提高了反應(yīng)的傳質(zhì)效果，同時由于通入氮氣和出氣口除水裝置也能降低副反應(yīng)的發(fā)生幾率

3、，微波輻射大大提高了反應(yīng)效率，構(gòu)建了快速、經(jīng)濟(jì)的多肽微波輔助多肽合成小試實驗新平臺。
　　 (2)在多肽固相合成的困難縮合反應(yīng)中，運用微波輔助技術(shù)和新型反應(yīng)器研究了五種大位阻氨基酸與H-Pro-CTC樹脂的縮合反應(yīng)，最終使用三次縮合的策略，分別在DMF/NMP/THF(體積比為1:1:1)、NMP/DMSO/THF(體積比為4:1:1)、DMF/DMSO/THF(體積比為4:1:1)混合溶劑中縮合一次，每次縮合使用的最優(yōu)條件為微

4、波輻射3 min、反應(yīng)溫度35℃、持續(xù)時間3 min、縮合試劑HBTU/HOBt/DIEA(摩爾比為1:1:2)，氨基酸濃度7 mmol/L與H-Pro-CTC樹脂為等物質(zhì)的量反應(yīng)，氨基酸總過量倍數(shù)僅為2倍，大大減少氨基酸的用量，F(xiàn)moc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Leu-OH與H-Pro-CTC樹脂的縮合率分別高達(dá)84.7％、87.1％、88.3

5、％、89.9％和88.6％，與用傳統(tǒng)固相肽合成反應(yīng)器在常規(guī)條件下反應(yīng)相比，縮合率分別提高了23.2％、21％、16.6％、17.7％和17.3％。
　　 (3)應(yīng)用新型固相肽合成反應(yīng)器，應(yīng)用Fmoc/tBu策略，室溫25℃下由Pro-CTC樹脂開始，HBTU/HOBt/DIEA(摩爾比為1:1:2)為縮合試劑，合成多肽衍生物醋酸亮丙瑞林，粗肽得率57.4％。
　　 (4)運用新型固相肽合成反應(yīng)器在醋酸亮丙瑞林合成中引入微