牦牛角性狀候選基因的克隆、表達分析及MicroRNA研究.pdf

1、無角牦牛便于管理，減少牛群之間的爭斗傷害，避免不必要的經(jīng)濟損失。目前有關(guān)牦牛無角性狀調(diào)控主效基因及機理的研究尚屬空白。本研究以無角牦牛和有角牦牛為研究對象，利用分子生物技術(shù)克隆牦牛角性狀候選基因，并分析候選基因及其MicroRNA的表達量差異，以期篩選影響牦牛無角性狀的主效基因，為無角牦牛的培育提供一些理論依據(jù)。試驗研究結(jié)果如下:
　　1.克隆獲得牦牛C1H21orf62、RXFP2和OLIG2基因的完整編碼區(qū)(CDS)。C1H2

2、1 orf62CDS區(qū)全長為510bp，編碼161個氨基酸。C1H21orf62蛋白是一種親水性蛋白，含有13個潛在的磷酸化位點，無跨膜域和信號肽;RXFP2基因CDS區(qū)全長為2213bp，編碼737個氨基酸。RXFP2是疏水性蛋白，含有28個潛在的磷酸化位點，RXFP2蛋白1～21位氨基酸存在信號肽，無跨膜域:OLIG2基因CDS區(qū)全長為651bp，編碼216個氨基酸。OLIG2是一種親水性蛋白，含有29個潛在的磷酸化位點，但無跨膜域

3、和信號肽。
　　2.通過實時熒光定量PCR方法分析了6個角性狀候選基因的表達量，結(jié)果表明SYNJ1、FOXL2和GCFC1基因mRNA相對表達量在牦牛無角和有角角基組織中差異不顯著;C1H21orf62基因在角基組織中mRNA相對表達量無角極顯著高于有角;RXFP2基因在角基組織中mRNA相對表達量無角顯著高于有角，說明牦牛無角性狀可能與C1H21orf62、RXFP2基因mRNA的轉(zhuǎn)錄豐度相關(guān)。OLIG2基因僅在無角角基組織中表

4、達，而在有角角基組織不表達，說明牦牛無角性狀可能與OLIG2基因的表達相關(guān)。
　　3.通過軟件預(yù)測牦牛OLIG2基因的靶標(biāo)MicroRNA:bta-miR-302b、bta-miR-302c和bta-miR-302d，并通過實時熒光定量PCR方法分析其表達量，結(jié)果表明bta-miR-302b、bta-miR-302c和bta-miR-302d在牦牛無角、有角角基組織中均表達，但是其表達量差異不顯著，推測牦牛OLIG2基因在牦牛角基