HPSEC-MALS法檢測ACYW135群腦膜炎球菌結(jié)合疫苗分子大小分布的方法建立、驗證及穩(wěn)定性跟蹤.pdf

1、腦膜炎球菌(Neisseria meningitidis)引起的流行性腦膜炎(簡稱流腦)是在全球范圍內(nèi)侵染兒童的主要傳染病之一。國際頻繁交往使流行菌群的地域間傳播不可避免，因此通過接種流腦疫苗來預(yù)防流行性腦膜炎成為控制該類疾病發(fā)生和傳播的重要手段。常見的流腦疫苗包括多糖疫苗和多糖-蛋白結(jié)合疫苗或結(jié)合疫苗，多糖與蛋白結(jié)合后形成的抗原是T細胞依賴性抗原，為全抗原，其誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答有T淋巴細胞參與，能產(chǎn)生免疫記憶。
　　根據(jù)其莢膜多糖性

2、質(zhì)的不同，腦膜炎球菌可分為13個血清群，其中A，B，C，W和Y五個群為主要流行群。因此，針對A，C，W和Y的多糖疫苗或多糖-蛋白結(jié)合疫苗是重要的流腦疫苗產(chǎn)品。分子大小分布與這類疫苗的免疫原性和保護性有著重要的相關(guān)性，是評價產(chǎn)品質(zhì)量和穩(wěn)定性的主要參數(shù)。由于傳統(tǒng)的檢測方法都非常繁瑣且時間很長，因此需要一種新能快速簡便的測定ACYW135群腦膜炎球菌結(jié)合疫苗的分子大小分布的方法。
　　本論文在傳統(tǒng)的光散射技術(shù)基礎(chǔ)上，將高效液相色譜-體積

3、排阻色譜-示差檢測-多角度激光光散射(HPLC-SEC-RI-MALS)聯(lián)用，經(jīng)過對HPSEC-MALS法方法的建立和驗證，最終確立了一種檢測ACYW135群腦膜炎球菌結(jié)合疫苗的分子大小分布的新方法。該方法在不需要標(biāo)準(zhǔn)樣品的情況下，能快速準(zhǔn)確地測定出四價流腦結(jié)合疫苗的分子大小等，而且準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性很好。
　　對ACYW135群腦膜炎球菌結(jié)合疫苗結(jié)合原液進行一系列破壞性處理后，運用HPSEC-MALS法觀察其強力破壞后原液中的主要成