C-Met抑制劑BD118212單藥或聯(lián)合吉非替尼抑制肺腺癌細胞株及相關(guān)機制的研究.pdf

1、第一章:BD118212對肺腺癌H1975、PC9、A549細胞增殖抑制、凋亡誘導(dǎo)作用
　　研究目的:研究BD118212對人肺腺癌H1975、PC9、A549細胞抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡的作用
　　研究方法:用不同濃度的BD118212干預(yù)人肺腺癌H1975、PC9、A549細胞，四甲基偶氮唑藍(MTT)法檢測細胞增殖抑制的情況，AnnexinⅤ-FITC/PI雙染流式細胞儀術(shù)檢測細胞的凋亡率。
　　結(jié)果:1.MTT比色法

2、檢測不同濃度BD118212（0μmol/l、0.05μmol/l、0.1μmol/l、0.5μmol/l、10μmol/l、20μmol/l、40μmol/l)作用于H1975、PC9、A549三株細胞24h、48h和72h后，發(fā)現(xiàn)隨著藥物濃度的提高、作用時間的延長，BD118212對H1975、PC9、A549細胞的增殖抑制作用逐漸增強。
　　2.不同濃度BD118212(0μmol/l、0.05μmol/l、0.1μmol/

3、l、0.5μmol/l、10μmol/l、20μmol/l、40μmol/l)干預(yù)H1975、PC9、A549三株細胞72小時后，發(fā)現(xiàn)隨著藥物濃度的上升，藥物對H1975、PC9、A549凋亡作用增強。BD118212干預(yù)組與對照組相比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:1、體外實驗表明，在一定濃度范圍內(nèi)，BD118212對人肺腺癌細胞株H1975、PC9、A549具有抑制增殖作用，且作用具有濃度與時間依賴性。

4、>　　2、BD118212在體外可誘導(dǎo)人肺腺癌細胞株H1975、PC9、A549凋亡，其作用具有濃度依賴性。
　　第二章:BD118212對H1975、PC9肺癌細胞株吉非替尼敏感性的影響及其機制
　　研究目的:研究BD118212對H1975、PC9細胞吉非替尼敏感性的影響及相關(guān)可能機制。
　　研究方法:用吉非替尼（H1975組濃度為1μmol/L，PC9組為0.5μmol/L）跟不同濃度的BD118212(0μmo

5、l/l、0.05μmol/l、0.1μmol/l、0.5μmol/l、10μmol/l、20μmol/l、40μmol/l)處理H1975、PC9兩種細胞72小時，用MTT法檢測細胞增殖抑制率，判斷不同濃度BD118212對H1975、PC9兩株細胞吉非替尼敏感性的影響。以Western Blot法檢測H1975、PC9肺癌細胞株被c-Met抑制劑、吉非替尼以及聯(lián)合用藥干預(yù)后phospho-ERK1/2、phospho-AKT、phos

6、pho-STAT3相關(guān)蛋白的變化。
　　結(jié)果:1.MTT法檢測發(fā)現(xiàn)，細胞株H1975、PC9在不同濃度BD118212與吉非替尼聯(lián)用后，均能較單藥吉非替尼更強地抑制細胞增殖。H1975細胞株在BD118212濃度為20μmol/l至40μmol/l之間表現(xiàn)為相加效應(yīng)，PC9細胞株在BD118212濃度為10μmol/l至40μmol/l之間表現(xiàn)為相加效應(yīng)。H1975和PC9細胞株在BD118212的其它實驗濃度范圍內(nèi)時兩藥均表現(xiàn)為

7、協(xié)同作用，且PC9在低劑量的BD118212的協(xié)同效應(yīng)較明顯。
　　2.Western Blot法檢測示0.05μmol/L BD118212、0.5μmol/l吉非替尼或兩藥聯(lián)合干預(yù)H1975、PC9細胞后，均能引起phospho-ERK1/2、phospho-AKT、phospho-STAT3表達的下調(diào)。聯(lián)合用藥組較吉非替尼單藥組有顯著差異(P＜0.05)。
　　結(jié)論:一定濃度范圍內(nèi)，BD118212具有增強H1975、