基于分子標(biāo)記的三疣梭子蟹和中國對蝦增殖放流效果研究.pdf

1、三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）和中國對蝦(Fenneropenaeus ch inensis)是我國重要的捕撈和增養(yǎng)殖甲殼類。隨著過度捕撈和環(huán)境惡化，兩者的自然資源量大幅度的減少。增殖放流作為補充自然資源，改善生態(tài)環(huán)境的一種方法，已被廣泛地應(yīng)用于三疣梭子蟹和中國對蝦。然而由于甲殼類放流數(shù)量多、規(guī)格小等特點，常規(guī)的標(biāo)記方法不適用于三疣梭子蟹和中國對蝦的增殖放流效果評價工作。故本研究采用線粒體控制區(qū)和微衛(wèi)星分

2、子標(biāo)記，對山東近海的放流效果進行研究，以期為未來的工作提供科學(xué)的指導(dǎo)和技術(shù)的支撐。
　　1、基于線粒體控制區(qū)和微衛(wèi)星分子標(biāo)記的三疣梭子蟹增殖放流效果研究
　　(1)線粒體控制區(qū)分析:對524只親蟹和6個批次的547只回捕三疣梭子蟹的線粒體控制區(qū)進行擴增，序列分析結(jié)果顯示:234只親蟹沒有對應(yīng)單倍型的回捕個體，被排除;242只回捕三疣梭子蟹只擁有回捕個體特有的單倍型，沒有找到其對應(yīng)的親蟹，被排除比例為44.24％;未排除的30

3、5尾回捕個體可能是放流的蟹苗，占回捕蟹總數(shù)的55.76％。(2)對擁有相同單倍型的290親蟹和305只回捕個體進行微衛(wèi)星分析，結(jié)果顯示:290只親蟹中，200只不存在對應(yīng)的回捕個體，被排除;305只回捕蟹中223只不是放流的蟹苗，占回捕蟹總數(shù)的40.77％，剩余81尾回捕蟹被確認(rèn)為放流的蟹苗，占回捕蟹總數(shù)的14.81％。
　　綜合線粒體控制區(qū)和微衛(wèi)星的實驗結(jié)果，524只親蟹中，434只沒有對應(yīng)的回捕蟹，被排除，剩余的90只親蟹存在

4、對應(yīng)的回捕蟹，對增殖放流做出了貢獻;547只回捕蟹中，81只為放流的蟹苗，占回捕蟹總數(shù)的14.81％。根據(jù)二者的實驗結(jié)果，還可以對蟹苗的來源進行分析，評價不同放流點的放流效果。結(jié)果表明，使用線粒體控制區(qū)序列和微衛(wèi)星分子標(biāo)記能夠有效的對增殖放流效果做出評價。
　　2、基于微衛(wèi)星分子標(biāo)記的中國對蝦增殖放流效果研究
　　在前期控制區(qū)分子標(biāo)記對中國對蝦的親蝦和回捕對蝦進行單倍型分型研究基礎(chǔ)上，對其中個體數(shù)較多的三個單倍型(Hap7，

5、Hap11，Hap15)，進行微衛(wèi)星分析，以評價2012年和2013年的增殖放流效果，比較分析中國對蝦不同世代間的遺傳差異。
　　利用8個微衛(wèi)星引物對2012年123尾親蝦和174尾回捕對蝦進行分析，結(jié)果顯示，(1)174尾回捕對蝦中，90尾個體在8個微衛(wèi)星位點上與雌性親蝦一致，為放流的對蝦苗種，占回捕對蝦總數(shù)的51.72％;(2)不同回捕時間的放流效果存在很大差異，2012年秋季回捕的140尾對蝦中，79尾為放流的對蝦苗種，占總

6、數(shù)的17.03％;2013年春季回捕34尾對蝦中，11尾為放流的對蝦苗種，占總數(shù)的4.9％。秋季回捕的樣品中放流蝦苗的比例遠(yuǎn)高于春季回捕;(3)不同規(guī)格的蝦苗的放流效果不同。90尾確認(rèn)為放流蝦苗的回捕個體中，43尾放流時為大規(guī)格蝦苗，47尾為小規(guī)格蝦苗，小規(guī)格蝦苗的放流效果不亞于大規(guī)模苗種。(4)親蝦對子代的貢獻方面存在很大差異，小部分的親蝦繁育了大部分的放流蝦苗。
　　利用8個微衛(wèi)星引物對2013年39尾親蝦和85尾回捕對蝦進行

7、分析，結(jié)果顯示，(1)85尾回捕對蝦中，20尾回捕對蝦為放流蝦苗，占回捕對蝦總數(shù)的23.53％。(2)根據(jù)親蝦和放流蝦苗的對應(yīng)關(guān)系，推測放流蝦苗來源，10尾放流蝦苗為昌邑海捕親蝦的后代，8尾為昌邑養(yǎng)殖越冬親蝦的后代，2尾為無棣親蝦的后代。(3)2013年的回捕對蝦中，存在6尾2012年親蝦的子二代。
　　中國對蝦不同世代間遺傳多樣性比較分析結(jié)果顯示，(1)中國對蝦群體遺傳多樣性水平較高。(2)中國對蝦群體的近交現(xiàn)象都比較嚴(yán)重。(3