吡格列酮對RANKL聯(lián)合M-CSF體外誘導的人破骨樣細胞MMP-9mRNA表達的影響.pdf

1、目的：探討吡格列酮 (pioglitazone)對核因子NF-κB受體激活劑配體(receptor activator of NF-κB ligand，RANKL)聯(lián)合巨噬細胞集落刺激因子(macrophage-colony stimulating factor，M-CSF)誘導的人破骨樣細胞(osteoclast-like cells，OLCs) 基質(zhì)金屬蛋白酶-9 (matrix metalloproteinase-9，MMP-9)

2、 mRNA表達的影響。
　　 方法：從人外周血以密度梯度離心法分離出單個核細胞貼壁培養(yǎng)，之后以RANKL(50 ng/mL)聯(lián)合M-CSF(25ng/mL)進行誘導。14天后使用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法以及掃描電鏡觀察骨片以鑒定細胞是否具有破骨細胞的特征。誘導成功后再使用不同濃度的吡格列酮(0，10-5，10-6，10-7mol/l)繼續(xù)干預培養(yǎng)48小時，之后收集各組細胞，使用逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)的方法

3、檢測各組MMP-9 mRNA的表達變化。
　　 結果：(1) RANKL聯(lián)合M-CSF誘導生成的細胞形態(tài)具備破骨細胞的特征，抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP) 染色陽性,具有在骨片上形成骨吸收陷窩的能力。(2) RT-PCR檢測結果顯示：人破骨樣細胞能夠表達MMP-9 mRNA。(3)在各濃度吡格列酮(10-5，10-6，10-7mol/l) 干預培養(yǎng)48小時后，MMP-9 mRNA表達均較空白對照組顯著下降(P<0.01)，各不