KIX-1參與糖尿病大鼠肺上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化.pdf

1、研究背景: 糖尿病是一種以持續(xù)高血糖為特征的代謝紊亂性疾病，可導(dǎo)致組織器官的代謝異常、功能障礙以及結(jié)構(gòu)改變，引發(fā)多種慢性并發(fā)癥。糖尿病肺纖維化是糖尿病的慢性并發(fā)癥之一。研究表明，損傷的肺上皮細(xì)胞經(jīng)過(guò)間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）能夠?qū)е路卫w維化。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)是組織纖維化時(shí)“中樞”的信號(hào)因子，與細(xì)胞外基

2、質(zhì)代謝和纖維化形成密切相關(guān)，能誘導(dǎo)肺纖維化早期的EMT。植物凝集素樣氧化性低密度脂蛋白受體-1(lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1,LOX-1)是1997年發(fā)現(xiàn)于血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的ox-LDL特異性受體，參與體內(nèi)多種信號(hào)通路的調(diào)節(jié)，導(dǎo)致氧化應(yīng)激和炎癥。研究證明，LOX-1能夠介導(dǎo)TGF-β1誘導(dǎo)的膠原蛋白沉積及組織纖維化，高糖能夠誘導(dǎo)LOX-1的表達(dá)而上調(diào)TGF

3、-β1。核轉(zhuǎn)錄因子KLF6（Krüppel-like factors6，KLF6）是鋅指轉(zhuǎn)錄因子，能調(diào)節(jié)多種細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化、增殖及凋亡，參與多種疾病的發(fā)生和發(fā)展。研究表明，KLF6參與TGF-β1誘導(dǎo)的腎近曲小管上皮細(xì)胞EMT。本實(shí)驗(yàn)將探討糖尿病肺纖維化時(shí)LOX-1表達(dá)是否發(fā)生變化，LOX-1是否通過(guò)與KLF-6/TGF-β1信號(hào)通路相互作用而介導(dǎo)糖尿病肺纖維化時(shí)EMT。
　　研究方法: 雄性SD大鼠高脂高糖飲食加單次腹腔注射鏈

4、脲霉素(streptozotocin，STZ)35 mg/kg，建立2型糖尿病大鼠模型。實(shí)驗(yàn)分為正常對(duì)照組和2型糖尿病組。高脂高糖飲食加單次腹腔注射鏈脲霉素處理8周后，取尾靜脈血檢測(cè)大鼠空腹血糖，而后繼續(xù)飼以高脂高糖飲食4周后處死。HE染色檢測(cè)大鼠肺組織病理變化;Masson染色檢測(cè)大鼠肺組織膠原沉積;免疫組織化學(xué)檢測(cè)大鼠肺組織LOX-1、TGF-β1、KLF6、EMT的標(biāo)志物波形蛋白(vimentin)和上皮鈣粘附蛋白(E-cadhe

5、rin，E-cad)的蛋白表達(dá)并定位;real-time PCR檢測(cè)大鼠的肺組織LOX-1、TGF-β1、KLF6、vimentin和E-cad的mRNA表達(dá);Western blot檢測(cè)E-cad的蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果: 與正常對(duì)照組比較，糖尿病大鼠空腹血糖顯著增高;與正常對(duì)照組比較，糖尿病大鼠肺部發(fā)生明顯的纖維化樣病理改變，肺組織結(jié)構(gòu)破壞，肺泡間隔增寬，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)以及纖維組織增生;與正常對(duì)照組比較，糖尿病大鼠肺組織發(fā)生明顯的