Cajal間質(zhì)細(xì)胞與P物質(zhì)在糖尿病大鼠結(jié)腸組織中的改變.pdf

1、第一部分糖尿病大鼠模型的建立 目的：建立糖尿病大鼠模型，為研究糖尿病胃腸病變的機(jī)制提供良好載體。 方法：SD大鼠隨機(jī)分為二組，糖尿病組20只，對(duì)照組10只，SPF環(huán)境飼養(yǎng)。糖尿病組大鼠單劑量腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ，80mg/kg)；對(duì)照組大鼠單劑量腹腔注射等量檸檬酸緩沖液。48-72h后尾靜脈采血，血糖儀測(cè)定全血血糖，血糖＞16.7mmol/L，尿糖在3+～4+，且能維持1周以上者，確定為糖尿病大鼠。所有大鼠造模后飼

2、養(yǎng)6周，檢測(cè)血糖和胃腸推進(jìn)率。 結(jié)果：糖尿病組大鼠造模成功10只(造模未成功的10只大鼠從實(shí)驗(yàn)中剔除)。與對(duì)照組相比，糖尿病大鼠血糖明顯高于對(duì)照組(P＜0.001)；胃腸推進(jìn)率明顯低于對(duì)照組(P＜0.05)。 結(jié)論：糖尿病大鼠胃腸推進(jìn)率較對(duì)照組明顯減慢，提示造模6周后糖尿病大鼠存在胃腸運(yùn)動(dòng)減慢。 第二部分Cajal間質(zhì)細(xì)胞在糖尿病大鼠結(jié)腸組織中的改變 目的：探討糖尿病大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)減慢與Cajal間質(zhì)細(xì)胞的

3、相關(guān)性。 方法：兩組大鼠飼養(yǎng)6周后脫臼處死，剪取兩組大鼠近端和遠(yuǎn)端結(jié)腸組織各一段(長(zhǎng)約0.5cm)，用免疫組化方法觀察近端和遠(yuǎn)端結(jié)腸組織內(nèi)Cajal間質(zhì)細(xì)胞的分布和表達(dá)；用Westernblot方法檢測(cè)近端和遠(yuǎn)端結(jié)腸內(nèi)c-kit蛋白的表達(dá)。 結(jié)果：大鼠結(jié)腸組織Cajal間質(zhì)細(xì)胞主要分布于肌間神經(jīng)叢、黏膜下、以及環(huán)形肌與縱行肌層內(nèi)；免疫組化和Westernblot檢測(cè)都顯示糖尿病組大鼠近端和遠(yuǎn)端結(jié)腸組織內(nèi)Cajal間質(zhì)細(xì)胞

4、的表達(dá)較對(duì)照組均明顯減少(P均＜0.05)。 結(jié)論：糖尿病大鼠近端和遠(yuǎn)端結(jié)腸組織中Cajal細(xì)胞數(shù)量、c-kit蛋白均明顯減少，提示結(jié)腸組織內(nèi)Cajal間質(zhì)細(xì)胞表達(dá)的變化可能是糖尿病大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)減慢的原因之一。 第三部分P物質(zhì)在糖尿病大鼠結(jié)腸組織中的改變 目的：探討糖尿病大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)減慢與P物質(zhì)的相關(guān)性。 方法：免疫組化方法觀察P物質(zhì)在兩組大鼠近端和遠(yuǎn)端結(jié)腸組織內(nèi)的分布和表達(dá)；用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)法(R