噁喹酸在凡納濱對蝦體內(nèi)藥動學(xué)及對弧菌的體外藥效學(xué).pdf

1、近年來，凡納濱對蝦養(yǎng)殖發(fā)展迅速，已成為我國對蝦類養(yǎng)殖的主要品種，然而大規(guī)模集約化養(yǎng)殖帶來的病害問題，尤其是弧菌病，對對蝦養(yǎng)殖業(yè)影響很大。因此，需要一種具有廣譜抗菌性的藥物來減少病害的發(fā)生，同時要求其殘留低、對水生環(huán)境危害較小、不易產(chǎn)生細菌耐藥性。通過對藥物的藥物代謝動力學(xué)結(jié)合藥效學(xué)研究能夠為藥物合理使用提供理論依據(jù)。
　　噁喹酸是我國國標漁藥抗菌藥物之一，關(guān)于噁喹酸的藥物代謝動力學(xué)主要集中在魚類上，未發(fā)現(xiàn)在凡納濱對蝦上的藥動學(xué)研究

2、報道。針對我國對蝦養(yǎng)殖現(xiàn)狀，本文首先建立了噁喹酸在對蝦組織中殘留的測定方法，繼而研究了噁喹酸散和復(fù)方噁喹酸粉兩種制劑在凡納濱對蝦體內(nèi)的藥物代謝動力學(xué)研究，確定其在凡納濱對蝦組織內(nèi)的分布與消除規(guī)律，根據(jù)肌肉可食組織中的消除規(guī)律，結(jié)合最高殘留限量標準，確定噁喹酸2種制劑在凡納濱對蝦體內(nèi)的休藥期，最后開展了噁喹酸對弧菌的體外藥效學(xué)試驗，建立了PK/PD聯(lián)合作用參數(shù)，為對蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)中噁喹酸的合理使用提供技術(shù)支撐。
　　1.對蝦組織中噁喹酸

3、殘留的反相液相色譜法測定方法的建立
　　在比較不同檢測波長、流動相對噁喹酸色譜行為影響，以及不同提取方法對噁喹酸回收率影響的基礎(chǔ)上，建立了測定對蝦血淋巴、肌肉和肝胰腺等組織中噁喹酸含量的反相高效液相色譜法，方法以乙腈和0.01 mol·L-1四丁基溴化銨（磷酸調(diào)節(jié)pH為2.75）為流動相，色譜柱為Aglient Zorbax SB-C18（4.6×150mm，5μm），柱溫40℃；熒光檢測器波長 Ex=265nm、Em=380nm

4、；進樣量10μL，流速1.0 mL·min-1。噁喹酸在0.002~10μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)R2=0.9996~0.9999。采用乙腈提取對蝦血淋巴、肌肉、肝胰腺和鰓組織中噁喹酸，加標回收率為84.70％～90.60%，日內(nèi)精密度為1.60%～4.02%，日間精密度為2.91%～4.73%，定量檢測限分別為0.02μg·mL-1、0.01μg·g-1、0.02μg·g-1和0.02μg·g-1。該方法操作簡單，重現(xiàn)

5、性好，藥峰無干擾，適用于對蝦生物樣品中噁喹酸含量的分析。
　　2.噁喹酸散在凡納濱對蝦體內(nèi)藥動學(xué)及組織分布和消除規(guī)律
　　研究不同給藥劑量（10 mg·kg-1、30mg·kg-1和80mg·kg-1）下噁喹酸散在凡納濱對蝦體內(nèi)藥動學(xué)，以及在肌肉、肝胰腺和鰓組織中的分布和消除規(guī)律，為其安全有效使用提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。研究表明，對蝦攝食3個劑量的藥餌后，血淋巴噁喹酸藥物濃度-時間關(guān)系曲線均適合采用一級吸收二室模型來描述。血淋巴和肌肉

6、的達峰時間均為2 h；3個劑量組的血藥峰濃度Cmax分別為4.31 mg·L-1、14.93 mg·L-1和16.62 mg·L-1，肌肉中藥物峰濃度分別為1.62 mg·kg-1、5.80 mg·kg-1和7.36 mg·kg-1；肝胰腺中藥物達峰時間為0.5 h，3個劑量組的達峰濃度分別為7.90 mg·kg-1、27.23 mg·kg-1和60.51 mg·kg-1。鰓組織藥物達峰相對較晚，Tmax=4 h，達峰濃度Cmax分別為

7、2.87 mg·kg-1、8.08 mg·kg-1和12.12 mg·kg-1。盡管肝胰腺達峰濃度最高，明顯高于各劑量組血淋巴Cmax，但其曲線下面積（AUC）卻均低于血淋巴，這因為肝胰腺中藥物消除半衰期最小，說明肝胰腺中藥物消除快。隨著給藥劑量升高，噁喹酸在對蝦肌肉組織中消除時間延長，休藥期也隨之延長。以30μg·kg-1為對蝦的最高殘留限量，噁喹酸散的3種給藥劑量在凡納濱對蝦中的理論休藥期分別為74.7h、90.1和135.9h。<

8、br>　　3.復(fù)方噁喹酸粉在凡納濱對蝦體內(nèi)藥動學(xué)
　　研究了復(fù)方噁喹酸粉藥餌投喂在凡納濱對蝦體內(nèi)藥動學(xué)和組織中消除規(guī)律，制定了用藥方案和休藥期。以30 mg·kg-1劑量噁喹酸口服給藥后，凡納濱對蝦血淋巴噁喹酸濃度-時間關(guān)系曲線均符合一級吸收的二室開放動力學(xué)模型。血淋巴中噁喹酸達峰濃度（Cmax）、達峰時間（Tmax）、曲線下面積（AUC0-24）和消除半衰期（t1/2z）分別為14.70 mg·L-1、2 h、244.6 mg·

9、L-1·h和18.56 h；肌肉、肝胰腺和鰓的峰濃度（Cmax）分別為4.11 mg·kg-1、17.20 mg·kg-1和7.01 mg·kg-1，消除半衰期（t1/2z）分別為10.71h、12.31 h和16.75 h。凡納濱對蝦能很好地吸收噁喹酸，肌肉中噁喹酸消除快。以30μg·kg-1為最高殘留限量，噁喹酸在凡納濱對蝦中的理論休藥期為91.7h。
　　4.噁喹酸對弧菌的體外藥效作用及PK/PD聯(lián)合作用參數(shù)
　　檢測

10、了噁喹酸對對蝦源弧菌的最小抑菌濃度和最小殺菌濃度，建立了藥動/藥效（PK/PD）關(guān)系，結(jié)果表明，噁喹酸對132株弧菌的MIC和MBC值接近，主要分布在0.15~1.25μg·mL-1，MIC50和MIC90分別為0.62μg·mL-1和1.25μg·mL-1。結(jié)合PK/PD相互關(guān)系參數(shù)Cmax/MIC90和AUC0-24/MIC90，研究表明，兩種制劑以30 mg·kg-1劑量一日一次藥餌給藥，能有效地防治弧菌引起的細菌性疾病，且不易產(chǎn)