載脂蛋白和脂質(zhì)在老年黃斑變性發(fā)病機制中的研究.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文載脂蛋白和脂質(zhì)在老年黃斑變性發(fā)病機制中的研究學(xué)位申請人：王嵐導(dǎo)師姓名及職稱：彭太住教援專業(yè)名稱：～旦墾型堂2006年12月載脂蛋白和脂質(zhì)在老年黃斑變性發(fā)病機制中的研究干文搐要油二酯轉(zhuǎn)移蛋白的基因表達。吞噬光感受器細胞外節(jié)后，RPEJ細胞中脂質(zhì)增加。IlPE—J細胞的培養(yǎng)基中加入長鏈脂肪酸后，細胞可以新合成和分泌中性脂質(zhì)。第2章載脂蛋白、非酯化膽固醇和酯化膽固醇在分離的玻璃膜疣中的分布目的：檢測載脂蛋白(apo)基因在

2、人體視網(wǎng)膜色素上皮細胞和神經(jīng)視網(wǎng)膜中的表達；檢測載脂蛋白在黃斑區(qū)外玻璃膜疣的免疫原性及分布；檢測膽固醇在玻璃膜疣的分布，為玻璃膜疣的生物合成及視覺影像新技術(shù)提供信息。方法：用RT—PCR方法檢測人體視網(wǎng)膜色素上皮細胞、視阱膜及肝臟腫瘤來源的HepG2細胞中的載脂蛋白mRNA；從lO個黃斑區(qū)正常的捐獻者(58歲至93歲)的眼球中人工分離玻璃膜疣，眼球于捐獻者死后6小時內(nèi)取出并固定于4％多聚甲醛溶液。冰凍切片收集玻璃膜疣(每張切片6—57個

3、玻璃膜疣)，用間接免疫熒光的方法檢測載脂蛋白AI，AII，C—I，c—II，CIII，E，和J。Filipin染色檢測非酯化膽固醇和酯化膽固醇在玻璃膜疣中的分布。結(jié)果：載脂蛋白c—I，c—II，E，和J的RT—PCR產(chǎn)物能在視網(wǎng)膜和視網(wǎng)膜色素上皮細胞中檢測到。ApoAII僅在視網(wǎng)膜中發(fā)現(xiàn)。ApoC—IIl未在視網(wǎng)膜及視網(wǎng)膜色素上皮細胞中檢測到。所有載脂蛋白的抗原能在玻璃膜疣中檢測到，按其免疫反應(yīng)陽性百分比由高到低排列如下：ApoE(99

4、5％)，ApoJ(995％)，ApoCI(931％)，ApoB(804％)，ApoA—r(6109I)。ArIoAII(592％)，ApoC—II(577％)和ApoC—III(166％)。免疫反應(yīng)有的均勻分布于整個玻璃膜疣(567％)，有的局限分布于玻璃膜疣的外緣(160％)，有的以上兩種情況均有(212％)。非酯化膽固醇和酯化膽固醇均能在玻璃膜疣中檢測到。玻璃膜疣具有Filipin染色的核，此核富含非酯化膽同醇而缺乏酯化膽固醇；也具