CD4+CD29+T細胞與Th1-Th2在潰瘍性結腸炎中醫(yī)證型中的作用機制研究.pdf

1、目的:
　　通過病證結合的方法建立中醫(yī)證型潰瘍性結腸炎動物模型，并與臨床研究相結合，探討CD4+CD29+T細胞與Th1/Th2在不同證型潰瘍性結腸炎中的表達及其相關性。
　　方法:
　　1.前期標本收集
　　以南方醫(yī)院消化內(nèi)科門診、住院部及消化內(nèi)鏡中心的潰瘍性結腸炎患者31例及健康體檢者33例為研究對象，根據(jù)其證型分為健康組（15人）、單純濕熱組（18人）、非濕熱UC組（16人）和濕熱UC組（15人），收集外周

2、血和腸粘膜。
　　2.中醫(yī)證型潰瘍性結腸炎大鼠模型的建立與研究
　　60只SD大鼠隨機分為正常組（15只）、濕熱組（30只）和脾虛UC組(15只)。通過病證結合的方法建立相應證型的UC模型:采用高濕高溫+高脂高糖飲食的方法建立濕熱模型，采用隔日足量飲食+番瀉葉灌胃+游泳疲勞的方法建立脾虛模型，以上造模持續(xù)8周;于第6周濕熱組隨機分為單純濕熱組（15只）和濕熱UC組（15只），在脾虛、濕熱造模的基礎上加用2，4-二硝基氯苯(D

3、NCB)/乙酸法建立相應證型的UC模型。于第9周處死大鼠，收集外周血和結腸組織。
　　3.檢測方法
　　采用流式細胞術和免疫雙熒光法檢測外周血和結腸中CD4+CD29+T細胞的表達水平，采用免疫組化法觀察結腸T-bet和Gata-3的表達水平，采用Elisa法檢測外周血和結腸組織勻漿中IFN-γ、IL-12和IL-4的表達水平。
　　結果:
　　動物實驗及臨床實驗結果均顯示:
　　1.非濕熱（脾虛）UC組和

4、濕熱UC組CD4+CD29+、T-bet、IFN-γ、IL-12較正常組明顯升高(P＜0.05)，濕熱UC組CD4+CD29+、T-bet、IFN-γ、IL-12較非濕熱（脾虛）UC組升高(P＜0.05)。
　　2.非濕熱（脾虛）UC組Gata-3、IL-4較濕熱UC組高(P＜0.05)。
　　3.CD4+CD29+與T-bet、IFN-γ、 IL-12呈正相關(P＜0.05)。
　　結論:
　　1.通過病癥結合

5、方法可分別建立脾虛、濕熱型潰瘍性結腸炎大鼠模型，且在癥狀、病理及免疫上符合UC診斷。
　　2.濕熱型UC大鼠中有Th0向Th1分化的傾向，脾虛型UC大鼠中有Th0向Th2分化的傾向。
　　3.UC發(fā)病與CD4+CD29+T細胞增高、Th1/Th2失衡有關。其發(fā)病機制可能為在初期IFN-γ、IL-12刺激CD4+CD29+T細胞大量表達，其中一部分以記憶性CD4+CD29+T細胞的形式存儲下來，以Th1增高為主;中后期少量IF