調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和胃癌的臨床與實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、V781232博士學(xué)位論文(2005屆)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和胃癌的臨床與實(shí)驗(yàn)研究TheclinicalandexperimentalresearchOntheregulatoryTcellandstomachcancer研究生姓名龔壘指導(dǎo)教師姓名一爰造苤申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別匡鱟譴專業(yè)名稱皇b盤堂研究方向置垂鮑魚(yú)瘞堂鯊痘論文提交日期2QQ5生5旦調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和胃癌的臨床與實(shí)驗(yàn)研究中文摘要第二部分：體外分離純化外周血中的CD4CD25Treg細(xì)胞和CD8

2、T細(xì)胞目的：研究體外分離純化CD4CD25Treg細(xì)胞和CD8T的方法，并觀察體外擴(kuò)增的可能性。方法：選擇健康志愿者，取外周血，采用德國(guó)美天旎公司出品的免疫磁珠細(xì)胞分離系統(tǒng)，分離純化CD4CD25Treg細(xì)胞和CDST細(xì)胞，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞的純度，收獲的細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)和擴(kuò)增。結(jié)果：經(jīng)過(guò)免疫磁珠細(xì)胞分離系統(tǒng)獲得的CD4CD25Treg細(xì)胞和CD8T的純度分別為8655％和9178％。經(jīng)過(guò)IL2刺激的CD8T大量擴(kuò)增，而CD4CD25

3、Treg細(xì)胞擴(kuò)增不明顯。結(jié)論：通過(guò)免疫磁珠系統(tǒng)能夠獲得高純度的CD4CD25Treg細(xì)胞和CD8T細(xì)胞。利用IL一2能夠有效的擴(kuò)增CD8T細(xì)胞，而體外擴(kuò)增CD4CD25Treg細(xì)胞較為困難。關(guān)鍵詞：CD4CD25。I徊，調(diào)節(jié)性T秈，CDST細(xì)胞，純化，體外擴(kuò)增第三部分：CD4CD25Treg細(xì)胞對(duì)于CD8T細(xì)胞的抑制試驗(yàn)?zāi)康模和ㄟ^(guò)體外實(shí)驗(yàn)的方法，研究CD4CD25Treg細(xì)胞對(duì)于CD8T細(xì)胞的抑制，探討CD4CD25Treg細(xì)胞是否能夠

4、抑制抗腫瘤免疫反應(yīng)。方法：采用免疫磁珠細(xì)胞分離系統(tǒng)從外周血中分離純化得到的CD4CD25Treg細(xì)胞和CD8T細(xì)胞，進(jìn)行以下的試驗(yàn)：1)CD8T細(xì)胞殺傷SGC7901胃癌細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)。2)CD4CD25Treg細(xì)胞對(duì)于CD8T細(xì)胞的增殖抑制試驗(yàn)。3)CD4CD25T抑制CD8T細(xì)胞對(duì)于SGC一7901胃癌細(xì)胞的殺傷抑制試驗(yàn)。結(jié)果：1)按照不同比例混合培養(yǎng)的CD8T細(xì)胞對(duì)于SGC7901胃癌細(xì)胞的殺傷率是不同的，殺傷率隨著效靶比的增高而增高