鴨傳染性漿膜炎滅活疫苗免疫產蛋種鴨母源抗體及其保護力.pdf

1、本研究開展了建立基于脂多糖的間接酶聯免疫吸附試驗(LPS-ELISA)和基于鴨疫里默氏菌(RA)超聲裂解物的間接酶聯免疫吸附試驗(PRO-ELISA)檢測血清1型鴨疫里默氏菌(RA-1)抗體、鴨傳染性漿膜炎滅活疫苗免疫產蛋種鴨后其種蛋卵黃及6日齡雛鴨血清中LPS-ELISA抗體/PRO-ELISA抗體/試管凝集試驗抗體的消長規(guī)律、雛鴨母源抗體水平與抵抗RA-1強毒攻擊的關系評估等，獲得如下結果:
　　1、檢測RA-1抗體的LPS-

2、ELISA和PRO-ELISA方法建立
　　LPS-ELISA∶ LPS最佳包被濃度為12.50 ng/μL，血清最佳稀釋濃度為1∶800，酶標二抗最佳稀釋度為1∶400。
　　PRO-ELISA∶ RA超聲裂解抗原最佳包被濃度為1.56 ng/μL，血清最佳稀釋濃度為1∶400，酶標二抗最佳稀釋度為1∶800。
　　以上兩種方法與經典的RA試管凝集試驗具有較好的平行關系。
　　2、鴨傳染性漿膜炎滅活疫苗免疫種鴨

3、后抗體傳至卵黃及下一代6日齡雛鴨的消長規(guī)律
　　60只4月齡產蛋種鴨注射0.5mL鴨傳染性漿膜炎滅活疫苗，于第3、6、9、12、15、18、21、24、27、30、33、36天收集當天所產的鴨蛋，每個時間點每次收集30個，其中10個鴨蛋提取卵黃抗體，20個鴨蛋用來孵化雛鴨，每批次雛鴨孵育出來后于6日齡采集血液并分離血清，設60只4月齡產蛋種鴨不免疫疫苗對照。用試管凝集試驗和兩種不同的ELISA方法檢測抗體的水平，結果表明:疫苗免疫

4、種鴨后第6天即可檢測出卵黃抗體，第27天抗體水平達到最高，第33天后抗體水平開始緩慢降低，血清抗體水平與卵黃抗體水平變化規(guī)律基本一致，但血清抗體明顯偏低，對照組呈陰性。
　　3、鴨傳染性漿膜炎滅活疫苗免疫種鴨后下一代雛鴨母源抗體消長規(guī)律與雛鴨抵抗大劑量RA-1強毒攻擊的保護力
　　120只4月齡產蛋種鴨注射0.5mL鴨傳染性漿膜炎滅活疫苗，收集免疫后第27-33天鴨蛋孵育雛鴨，設80只4月齡產蛋種鴨不注射疫苗為對照組。開展兩

5、項試驗:(1)抗體檢測:采集1、3、6、9、12、15、18、21日齡雛鴨血清，用試管凝集試驗和兩種不同的ELISA方法檢測抗體的效價;(2)攻毒保護試驗:選3、6、9、12、15、18、21日齡雛鴨，進行攻毒，每個日齡選8只作為試驗組，每只雛鴨肌肉注射0.5mL含菌量為109CFU/mL RA-1強毒;對照組每個日齡選6只雛鴨注射相同劑量菌液;空白組每個日齡選4只雛鴨注射等量生理鹽水。結果表明:雛鴨體內母源抗體隨著日齡增長呈下降趨勢，