復(fù)合熒光染色法檢測(cè)人類精子頂體反應(yīng)和存活率的相關(guān)研究.pdf

1、目的：同時(shí)使用Hoechst 33258/FITC-Pisum sativum agglutinin(FITC-PSA)復(fù)合熒光染色法檢測(cè)精子頂體反應(yīng)和存活率，以評(píng)價(jià)此染色法的有效性和臨床應(yīng)用價(jià)值。 材料方法：18名既往有生育史的男性提供新鮮精液標(biāo)本。使用上游法收集標(biāo)本中的存活精子。Hoechst 33258加入標(biāo)本染色10分鐘，洗脫后涂片，吹干，再用FITC-PSA染色30分鐘。使用熒光顯微鏡觀測(cè)結(jié)果。同時(shí)進(jìn)行CTC金霉素染色

2、法檢測(cè)頂體完整率，及伊紅染色檢測(cè)精子的存活率用以對(duì)照。實(shí)驗(yàn)中使用鈣離子載體A23187誘發(fā)頂體反應(yīng)，比較使用鈣離子載體A23187前后的頂體反應(yīng)情況。 結(jié)果：觀察到4種不同染色結(jié)果的精子：a)存活的頂體反應(yīng)的精子，b）存活的頂體完整的精子，c）死亡的頂體反應(yīng)的精子，d) 死亡的頂體完整的精子。Hoechst 33258染色的結(jié)果和伊紅染色檢測(cè)的精子活率結(jié)果具有顯著相關(guān)性（r=0.633,P<0.01）。FITC-PSA和CTC檢

3、測(cè)精子頂體完整率結(jié)果具有顯著相關(guān)性（r=0.928，P<0.001）。Hoechst 33258/FITC-PSA復(fù)合染色可以發(fā)現(xiàn)鈣離子載體A23187具有誘發(fā)頂體反應(yīng)的效果。經(jīng)鈣離子載體A23187處理后存活的頂體完整的精子百分比顯著降低(P<0.01)，死亡的頂體反應(yīng)的精子和存活的頂體反應(yīng)的精子百分比顯著升高(P<0.01,P<0.05)。死亡的頂體完整的精子百分比基本沒有變化。 結(jié)論：Hoechst 33258/FITC-