SP和CGRP陽性神經(jīng)元在大鼠上橄欖復(fù)合體中的分布.pdf

1、目的：
　　研究大鼠上橄欖復(fù)合體（superior olivary complex,SOC）中P物質(zhì)（substance P,SP）和降鈣素基因相關(guān)肽（calcitonin-generelated peptide,CGRP）免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元的分布特點(diǎn)，并探討其意義。
　　方法：
　　按照大鼠腦立體定位圖譜對(duì)大鼠的第四腦室進(jìn)行定位，定位后行顱骨鉆孔，用微量注射器緩慢加壓注入秋水仙素（80～100μg/只）,留針觀察10

2、min。
　　動(dòng)物存活48h后，對(duì)其進(jìn)行灌注。斷頭后，剝除顱骨，取下腦干，用40g/L多聚甲醛再固定12h，然后置于300g/L蔗糖磷酸緩沖液(pH7.4，4℃)直至沉底。
　　根據(jù)核團(tuán)定位，對(duì)上橄欖復(fù)合體分別以40μm行冰凍切片，共三組貼片，每組8張標(biāo)本，分別行SP、SPc、CGRP免疫組化。
　　根據(jù)核團(tuán)定位，對(duì)上橄欖復(fù)合體分別行10μm冰凍切片，共四組貼片，每組8張標(biāo)本，分別行SP免疫熒光反應(yīng)，CGRP免疫熒光反

3、應(yīng)，SP-CGRP免疫熒光雙標(biāo)，對(duì)照組。
　　對(duì)照試驗(yàn)用抗體稀釋液代替第一抗體，其它試劑及步驟不變。
　　結(jié)果：
　　免疫組織化學(xué)染色：SP陽性神經(jīng)元胞體主要存在于大鼠Tz，呈梭形，體積較小，直徑約10～12μm，未見明顯突起；于LSO見大量SP陽性神經(jīng)纖維及終末，呈串珠狀及點(diǎn)狀，主要集中于LSO靠中線側(cè)。SPc陽性神經(jīng)元胞體主要存在于大鼠Tz、MSO、LSO，呈圓形、橢圓形不等，體積較大，直徑約25～30μm，有多個(gè)

4、突起。CGRP陽性神經(jīng)元主要位于LSO，呈卵圓形單極或雙極細(xì)胞，突起于橫切面上垂直于LSO長軸，胞體直徑約12～16μm，靠中線側(cè)較密集。
　　免疫熒光染色：SP陽性神經(jīng)元主要位于大鼠Tz，呈梭形、卵圓形，體積較小，直徑約11～13μm。CGRP陽性神經(jīng)元主要位于大鼠Tz和LSO，位于Tz中的呈多角形，體積較小，直徑約11～13μm；位于LSO中的呈卵圓形，體積較小，直徑約10～12μm。斜方體核內(nèi)見大量CGRP和SP雙標(biāo)神經(jīng)元胞