骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞自體移植治療缺血性腦卒中的臨床研究.pdf

1、廣州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞自體移植治療缺血性腦卒中的臨床研究姓名：譚敏申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：@指導(dǎo)教師：胡志兵20100501廣州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞自體移植治療缺血性腦卒中的臨床研究2療缺血性腦卒中的臨床療效及安全性，為臨床大力開(kāi)展BMSCs治療缺血性腦卒中提供臨床依據(jù)。2、研究?jī)?nèi)容和方法本課題研究共分為二部分。第一部分：介紹自體BMSCs實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)及擴(kuò)增傳代方法步驟，通過(guò)Ficoll分離法分離骨髓單個(gè)核細(xì)

2、胞（Mononuclearcells，MNCs），體外培養(yǎng)擴(kuò)增出BMSCs，并通過(guò)形態(tài)學(xué)特征及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)其表面標(biāo)志加以鑒定；第二部分：觀察臨床安全性，比較移植前、移植后隨訪3個(gè)月及6個(gè)月的臨床癥狀，采用NIHSS評(píng)分（NationalInstitutesofHealthStrokeScale，美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生院卒中量表）、BI指數(shù)（BarthelIndex，巴氏量表）及FCA量表（Functionalcomprehensiveasses

3、sment，功能綜合評(píng)定量表）評(píng)價(jià)患者神經(jīng)功能及認(rèn)知改變，比較影像學(xué)資料和伴隨疾病的改善情況。3、研究結(jié)果1）、骨髓單個(gè)核細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)3～5天時(shí)，增殖較慢，成纖維樣貼壁細(xì)胞逐漸出現(xiàn)；8～10天成纖維樣貼壁細(xì)胞增殖較快，細(xì)胞形態(tài)均一可達(dá)到80%融合；14天左右（傳代為第2代時(shí)），細(xì)胞生長(zhǎng)出現(xiàn)典型的漩渦狀排列，細(xì)胞融合度可達(dá)90%。流式細(xì)胞儀檢測(cè)BMSCs表面抗原高表達(dá)CD29、CD105及CD166，而低表達(dá)CD34、CD4及HLA

4、DR等。體外培養(yǎng)傳代到第二代時(shí)進(jìn)行流式細(xì)胞標(biāo)志物鑒定為BMSCs。2）、對(duì)5位缺血性腦卒中患者進(jìn)行BMSCs靜脈移植，均無(wú)寒戰(zhàn)發(fā)熱、皮疹、消化道不適、癲癇等不良反應(yīng)，隨訪3個(gè)月及半年內(nèi)無(wú)癲癇及腫瘤出現(xiàn)。移植前后臨床表現(xiàn)及查體（包括言語(yǔ)、運(yùn)動(dòng)、感覺(jué)、認(rèn)知及情感）、NIHSS、BI、FCA評(píng)分及影像學(xué)分析提示：失語(yǔ)、神經(jīng)功能、認(rèn)知功能、情感方面及梗塞面積大小均有不同程度的改善，而且對(duì)患者的伴有疾病（糖尿病、混合型癡呆、帶狀皰疹后神經(jīng)痛）亦有