人臍血細(xì)胞和胚胎骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療新生大鼠缺氧缺血性腦病的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文人臍血細(xì)胞和胚胎骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療新生大鼠缺氧缺血性腦病的實(shí)驗(yàn)研究姓名：朱美玲申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：李樹濃20040425立垡墨豎主燕羔三一塵壁蘭塑矍登璧塑量墼蹩童蓬王塑堅(jiān)塋壁塑堡塹蘭莖墼氅整璧壘堡壁堡箜塞墼墅窒hFBM／vlSCs)是否具備治療HIE的生物學(xué)特穗采用hFBMMSCs移植能否有效改善HIE所致的功能缺陷這些就是本研究的主要目的。必戇，器震以下4都傍研究：鐮一部徐：I

2、tlICBC熬本生物學(xué)特整磷究I1臍血多項(xiàng)指標(biāo)測定前兩已述，臍血HSPC可以分化為神經(jīng)細(xì)胞，那么HSPC含量與臍血神經(jīng)細(xì)胞分化潛能正稿關(guān)。為此，在本研究的第一部份酋先隨機(jī)統(tǒng)計(jì)分孛斥24份新生兒蘩蠹缽襁、惑騫棱鰓施霪otalNuclearCells，TNC)、蔻摹孩纓戇(TotalMononuelearCells，TMNC)、總集落形成單位(TotalColonyformingCellsTCFC)、TCD34(TotalCD34Cells

3、)以及MNC／NC等6項(xiàng)反映臍血HSPC含量參數(shù)。臍血平均體積達(dá)93ml：TNC、TMNC、TCFCs、TCD34分別為(i75077)x109、(i070。18x109、(O。57043xl薩、(50。t327。93)105；MNC／NC兔1。82108。結(jié)果表明新鮮臍盤富含HSPC，聯(lián)涿蕾臍矗具備強(qiáng)大翡孝棗經(jīng)細(xì)魏分純潛能。12HUCBC分離、凍存方法的研究為r便于隨時(shí)為臨床掇鏃HUCBC，脊必鼴對緞胞進(jìn)章亍凍存；患予新鮮臍血搴積大，

4、蕾先須對弼e魏C避季亍分離，霧豫多眾矗漿毒霪盔綞纛，爨越，分離技本對保障分離后HUCBC數(shù)撼非常重要。在本課題中通過反復(fù)實(shí)驗(yàn)擻索，建立了～種改良羥乙基淀粉(hydroxyethylstarch，ttES)分離方法，經(jīng)該方法分離后，臍血中TNC、TMNC及TCD34細(xì)胞獲得率分別離達(dá)(90o士32)％、(89啦28)％、(90，0e32)％，鴦效簿懲rHUCBC魏丟失。迄綏憨凍存方囂，絮耀Dextran40和=甲蒸亞砜(DimethylS

5、ulfoxide，DMSO)作為深祗濕凍存保護(hù)裁，經(jīng)BioArchive“3626全自勘凍存系統(tǒng)程序降溫盾貯存于一196“C液綴環(huán)境，能有效保存IUcBc生物學(xué)特性，阻不受凍存時(shí)間影響。顯示所建立的分離、凍存技術(shù)能保障灝奪貯的HUCBC數(shù)爨釃蔟量滿足臨床要求。13俸耱誘導(dǎo)HUCBC分純努簿經(jīng)群綴貔研究采用含丹參的誘導(dǎo)墻莽體系，體外誘導(dǎo)HUCBC向神經(jīng)樣細(xì)胞分化。結(jié)果：貼壁生長的HUCBC伸出長長的突起，并在突起米端出現(xiàn)一級和二級分支，類