NeuroD對短暫缺氧性腦損傷模型小鼠的學(xué)習(xí)記憶功能及其腦內(nèi)神經(jīng)干細胞分化作用的影響.pdf

1、【目的】
　　模擬新生兒出生窒息,建立新生小鼠短暫缺氧性腦損傷模型,研究缺氧對新生鼠認知功能的影響以及神經(jīng)源性分化因子(NeuroD)側(cè)腦室注射治療后神經(jīng)元再生情況,為新生兒圍產(chǎn)期窒息所致的缺氧缺血性腦病的防治研究提供實驗依據(jù)。
　　【方法】
　　1.參照Grojean的方法,新生5日齡(5d)小鼠短暫(10min)置于100％氮氣環(huán)境中,建立出生窒息的模型。采用神經(jīng)行為學(xué)觀察、HE染色觀察腦組織病理變化等方法,對動物

2、模型進行評價。
　　2.動物(100只新生5d小鼠)隨機分成對照組、缺氧組、缺氧后側(cè)腦室給予NeuroD組、缺氧后側(cè)腦室給予NeuroD Control組,采用RT-PCR檢測NeuroD表達量的變化;第6d取材,采用快速冰凍切片的免疫熒光雙標(biāo)法檢測BrdU與Doublecortin表達的變化。
　　【結(jié)果】
　　1.缺氧過程新生小鼠均出現(xiàn)全身紫紺、四肢爬動、意識障礙等神經(jīng)行為的異常。懸掛實驗、懸崖逃避實驗和Morri

3、s水迷宮實驗發(fā)現(xiàn),模型小鼠的智力下降和空間學(xué)習(xí)記憶功能減退。HE染色可見缺氧10min后海馬區(qū)神經(jīng)元損傷嚴重。
　　2.RT-PCR結(jié)果顯示,腦組織中可見NeuroD mRNA表達,但各組間無明顯差異。
　　3.免疫熒光結(jié)果顯示,在大腦皮質(zhì)區(qū)和海馬齒狀回可見NeuroD表達,但各組間無明顯差異。
　　【結(jié)論】
　　1.通過將新生小鼠短暫置于100%氮氣環(huán)境中的方法,可建立與人類新生兒缺氧缺血性腦病相似的新生小鼠短