川芎嗪和丹參酮ⅡA對(duì)心肌成纖維細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的作用研究.pdf

1、第一部分 新生大鼠心肌成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)及免疫組織化學(xué)檢測(cè)目的：檢測(cè)新生大鼠心肌成纖維細(xì)胞標(biāo)志性抗原，為進(jìn)一步研究做準(zhǔn)備。方法：采用體外培養(yǎng)和細(xì)胞免疫化學(xué)技術(shù)，觀察波形蛋白、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白、Ⅷ因子相關(guān)抗原和結(jié)蛋白在所培養(yǎng)的細(xì)胞中的表達(dá)。結(jié)果：所培養(yǎng)的細(xì)胞波形蛋白染色陽(yáng)性，其他均陰性。結(jié)論：所培養(yǎng)細(xì)胞是心肌成纖維細(xì)胞。關(guān)鍵詞：心肌成纖維細(xì)胞：免疫細(xì)胞化學(xué)第二部分 川芎嗪對(duì)新生大鼠心肌成纖維細(xì)胞分泌ET、NO、TNF α和TGF β<,1

2、>的影響 目的：探討川芎嗪(Tetrmethylpyrazine，TMP)對(duì)新生大鼠心肌成纖維細(xì)胞(Cardiac Fibroblast，CFs)分泌內(nèi)皮素(Endothelin，ET)，一氧化氮(Nitric Oxide，NO)，腫瘤壞死因子α(Tumor Necrosis Factor α，TNF-α)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β 1(Transforming Growth Factor β <,1>，TGF β<, 1>)的影響。方法

3、：采用胰酶消化法和差速貼壁法獲取CFs，用放射免疫分析法、硝酸還原酶法、雙抗夾心ELISA法分別測(cè)定不同條件下培養(yǎng)的CFs培養(yǎng)液上清中的ET、TNF-α、NO和TGF β<,1>的水平。結(jié)果：在給定濃度范圍內(nèi)川芎嗪可以按劑量依賴的方式抑制CFs分泌ET、TNF-α和TGF Bβ<,1>。有促進(jìn)CFs分泌NO趨勢(shì)，但是無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)論：川芎嗪可以劑量依賴性抑制新生大鼠CFs分泌ET、TNF-α和TGF β<,1>，對(duì)NO

4、合成無顯著影響。川芎嗪可能通過影響CFs分泌的細(xì)胞因子改變局部促細(xì)胞生長(zhǎng)因子與抑制細(xì)胞生長(zhǎng)因子的平衡關(guān)系，發(fā)揮其抑制心肌纖維化的作用。 第三部 分丹參酮ⅡA 對(duì)新生大鼠心肌成纖維細(xì)胞分泌ET、NO、TNF-α和TGFβ<,1>的影響目的：探討丹參酮ⅡA(Tanshinone ⅡA，TAN ⅡA)對(duì)新生大鼠心肌成纖維細(xì)胞分泌ET、NO、TNF-α和TGFβ1的影響。方法：采用胰酶消化法和差速貼壁法獲取CFs，用放射免疫分析法、硝酸

5、還原酶法、雙抗夾心ELISA法分別測(cè)定不同條件下培養(yǎng)的CFs培養(yǎng)液上清中的ET、TNF-α、NO和TGFβ1的水平。 結(jié)果：在給定濃度范圍內(nèi)，丹參酮ⅡA可以按劑量依賴方式促進(jìn)CFs分泌ET、TNF-α和TGFβ1，對(duì)NO分泌無明顯影響。結(jié)論：丹參酮ⅡA可以劑量依賴性促進(jìn)新生大鼠CFs分泌ET、TNF-α和TGFβ1對(duì)NO合成無顯著影響。丹參酮ⅡA抑制心肌纖維化作用可能與其分泌ET、TNF-α和TGFβ1無密切關(guān)系，體外實(shí)驗(yàn)中丹參