川芎嗪對(duì)溶血磷脂酸致心臟成纖維細(xì)胞增殖和膠原合成的影響.pdf

1、目的：觀察溶血磷脂酸(LPA)對(duì)體外培養(yǎng)心臟成纖維細(xì)胞(CFs)的增殖、膠原合成及促絲裂原蛋白活化激酶(MAPK)的影響，進(jìn)一步研究中藥單體川芎嗪(TMP)的干預(yù)作用。 方法：用消化法培養(yǎng)新生SD大鼠的CFs，用四氮唑藍(lán)(MTT)比色法測定細(xì)胞增殖，羥脯氨酸堿水解法測定膠原合成，并用Western blot的方法檢測MAPK中細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1／2(ERK1／2)的含量，分別觀察不同濃度LPA對(duì)CFs增殖和膠原合成的影響及TM

2、P的干預(yù)作用。 結(jié)果：①隨著LPA濃度的升高，MTT比色法A<,490>值呈上升趨勢。在藥物作用48h后，只有10<'-6>μmol／I。組A<,490>值較空白對(duì)照組有顯著升高(P<0.05)；作用至72h后，10<'-7>、10<'-6>μmol／L組A<,490>值較空白對(duì)照組有顯著升高(P<0.05)；作用至96h后，各組A<,490>值較空白對(duì)照組均有顯著升高(P<0.05或P<0.01)；②CFs分泌的膠原隨著LPA

3、作用濃度和時(shí)間的增加呈遞增趨勢。藥物作用48、72h，只有10<'-6>μmol／L，組膠原濃度較空白對(duì)照組有顯著升高(P<0.01)；作用至96h，各濃度組膠原含量均較對(duì)照組有顯著升高(P<0.05或P<0.01)，其中10<'-6>與10<'-7>/、10<'-8>μmol／L，組之間差異有顯著性(P<0.05)；③在LPA作用48h后，10<'-8>、10<'-7>μmol／L組膠原含量／A<,490>比值高于空白對(duì)照組，但與空白

4、對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，其中10<'-6>μmol／L，組的比值顯著高于空白對(duì)照組(P<0.05)；藥物作用至96h，中、高濃度的膠原含量／A<,490>比值均顯著高于空白對(duì)照組(P<0.05)；④在藥物作用的48h，20 mg／L濃度的TMP即表現(xiàn)明顯抑制LPA(10<'-6>μmol／L)誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖作用(P<0.05)，72h后抑制細(xì)胞增殖現(xiàn)象逐漸明顯，其中10、20 mg幾濃度組A<,490>伽值顯著低于LPA

5、組(P<0.001)，5mg／L濃度組TMP也表現(xiàn)出明顯抑制增殖作用(P<0.05)；⑤在TMP作用48h后，低濃度組(5mg／L)能輕度抑制LPA誘導(dǎo)的膠原合成作用，但與LPA組比較無顯著差異(P>0.05)，10、20mg／L濃度組產(chǎn)生明顯抑制作用(P<0.05或P<0.001)，TMP作用72h后，各濃度組均表現(xiàn)為顯著抑制膠原合成作用，并隨濃度的增加作用加強(qiáng)(P<0.05和p<0.001)；⑥在藥物作用的各個(gè)時(shí)間段，LPA組的膠原

6、含量／A<,490>比值均高于空白對(duì)照組，在TMP作用的48、72h，低濃度組(5mg／L)的膠原含量／A<,490>比值即低于LPA組，但與LPA組比較無顯著差異(P>0.05)，而中、高濃度組的比值顯著低于LPA組(p<0.05或p<0.001)，并隨濃度的增高作用增強(qiáng)；作用至96h，TMP各組比值均顯著低于LPA組(P<0.05或P<0.001)；⑦在LPA(10<'-6>μmol／L)作用10min后，磷酸化ERK1／2的表達(dá)較