趨化因子MCP-1在肺結(jié)核、HIV合并結(jié)核、肺癌患者外周血中的表達(dá)及相關(guān)機(jī)制的研究.pdf

1、目的：測定肺結(jié)核、HIV合并結(jié)核、肺癌患者血清和單個(gè)核細(xì)胞培養(yǎng)上清夜中趨化因子MCP-1的水平，并探討其在肺結(jié)核、HIV合并結(jié)核、肺癌患者發(fā)病中的作用及臨床意義。 方法：從呼吸科住院部篩選初次就診和復(fù)治的結(jié)核患者共37例，HIV合并結(jié)核8例，肺癌患者35例。結(jié)核組，男23例，女14例，年齡19-79歲，平均52.7歲，其中初治型17例，復(fù)治型18例，均為經(jīng)臨床X線，痰檢陽性或纖維支氣管鏡毛刷陽性，及抗結(jié)核治療有效且排除其他疾病的

2、結(jié)核患者；HIV合并肺結(jié)核組，男性5例，女性3例，年齡31-41歲，平均36.7歲；肺癌組，男21例，女14例，年齡45-85歲，平均60.3歲，其中鱗癌12例，腺癌13例，小細(xì)胞肺癌10例，均經(jīng)病理學(xué)(纖維支氣管鏡活檢或肺穿刺活檢)確診。正常對照組：2008年1月來本院健康體檢的人群，排除其他疾病，血液生化以及影象資料無明顯異常者，共20例，男11例，女9例，年齡在20-50歲，平均42.5歲。留取各組病例血清標(biāo)本，常規(guī)離心分離后取上

3、清液，-70℃保存待測。取肝素抗凝靜脈血3ml，用淋巴細(xì)胞分離液常規(guī)分離PBMCs，用含10％小牛血清RPMI1640培養(yǎng)液調(diào)細(xì)胞濃度為1×106/ml，臺(tái)盼藍(lán)染色，細(xì)胞活力＞95％，種入96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，加入lug/ml的ESAT6/CFP1010ul，建立復(fù)孔，置于37℃5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。預(yù)實(shí)驗(yàn)顯示培養(yǎng)24h時(shí)MCP-1的濃度達(dá)到高峰，于此時(shí)收集培養(yǎng)上清，-70℃保存，備用。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測各組標(biāo)

4、本中MCP-1的濃度和培養(yǎng)上清液中MCP-1的濃度。 結(jié)果：結(jié)核組血清MCP-1濃度為124.01±11.09pg/ml，其中初治型結(jié)核組MCP-1濃度為68.5±3.56pg/ml；復(fù)治型結(jié)核組MCP-1濃度為141.56±13.71pg/ml；HIV合并結(jié)核組血清MCP-1濃度220.6±4.82pg/ml；肺癌組血清MCP-1濃度為104.57±8.94pg/ml，其中鱗癌組為100.36±7.37pg/ml，腺癌組為10

5、8.73±5.72pg/ml，小細(xì)胞癌組為106.64±6.52pg/ml。正常對照組MCP-1濃度28±8.94pg/ml，結(jié)核組血清MCP-1濃度明顯高于正常組(P＜0.01)，復(fù)治結(jié)核組和初治結(jié)核組血清中的MCP-1濃度具顯著性差異(P＜0.05)；結(jié)核組、HIV合并結(jié)核組中血清的MCP-1濃度具顯著性差異(P＜0.01)；肺癌組明顯高于正常對照組(p＜0.01)。各組PBMCs培養(yǎng)上清液中MCP-1的濃度分別為結(jié)核組412.65

6、±28.26pg/ml，其中初治型結(jié)核組317.55±57.5pg/ml，復(fù)治型結(jié)核組465.5±40.5pg/ml；HIV合并結(jié)核組635.10±18.82pg/ml；肺癌組398.78±77.65pg/ml，其中鱗癌組為367.56±36.78pg/ml，腺癌組為402.73±56.12pg/ml，小細(xì)胞癌組為399.72±42.45pg/ml；正常對照組218.25±60.01pg/ml，結(jié)核組單個(gè)核細(xì)胞上清液MCP-1濃度高于正

7、常組(P＜0.01)；復(fù)治結(jié)核組和初治結(jié)核組單個(gè)核細(xì)胞上清液MCP-1濃度具顯著性差異(P＜0.05)；肺癌組單個(gè)核細(xì)胞上清液MCP-1濃度明顯高于正常組(P＜0.01)；HIV合并結(jié)核組單個(gè)核細(xì)胞上清液MCP-1濃度高于結(jié)核組，具顯著性差異(P＜0.05)；不同病理類型的肺癌血清和單個(gè)核細(xì)胞上清液MCP-1濃度無顯著差異(p＞0.05)。 結(jié)論： 1．結(jié)核組血清與單個(gè)核細(xì)胞上清液MCP-1濃度與正常組相比明顯升高(P＜

8、0.01)；復(fù)治型肺結(jié)核血清與單個(gè)核細(xì)胞上清液MCP-1濃度高于初治型(P＜0.05)；說明MCP-1在結(jié)核的致病過程中發(fā)揮著重要作用，單個(gè)核細(xì)胞是MCP-1的來源。 2. HIV合并結(jié)核組血清MCP-1濃度高于單純結(jié)核組(P＜0.01)；單個(gè)核細(xì)胞上清液MCP-1濃度也高于單純結(jié)核組(P＜0.05)。說明MCP-1在HIV合并結(jié)核的致病過程中發(fā)揮著重要作用，HIV感染合并肺結(jié)核組病情更易惡化。 3．肺癌患者血清與單個(gè)核