豬鏈球菌3種主要毒力因子多重PCR快速檢測方法的建立及其初步應用.pdf

1、豬鏈球菌(Streptococcus suis，SS)是一種重要的人畜共患病病原，根據(jù)菌體莢膜多糖抗原性的不同，分為35個血清型(1-34型，1/2型)。世界范圍內以SS2(Streptococcus suis type2，SS2)流行最廣，致病性最強，而且可引起人的感染并致死，其次是1型、7型和9型。上海地區(qū)作為全國大規(guī)模豬養(yǎng)殖場較多的地區(qū)之一，是養(yǎng)豬面積較大，輸出、輸入較大的城市，因此及時掌握上海地區(qū)致病性豬鏈球菌及其毒力因子的流行

2、病學，為以后預防和控制大規(guī)模暴發(fā)豬鏈球菌具有重要的意義。 2006年-2008年期間，通過對上海市動物疫病預防控制中心日常門診和4個某大型豬場的豬鏈球菌2型臨床調查，根據(jù)形態(tài)、培養(yǎng)特性，從1536份樣品中分離鑒定了304株豬源鏈球菌，利用已發(fā)表的豬鏈球菌2型菌株的莢膜多糖CPS2J的基因進行單重PCR檢測，結合生化特性鑒定，鑒定出12株豬鏈球菌2型。對12株SS2進行藥敏試驗，結果表明對頭孢拉啶、青霉素等產生了一定程度的耐藥性，

3、生化試驗結果表明分離株的生化特性不穩(wěn)定。 建立了豬鏈球菌3種主要毒力因子多重PCR快速檢測方法，實現(xiàn)對豬鏈球菌3種主要毒力因子的快速檢測，根據(jù)豬鏈球菌3種主要毒力因子epf、sly和gapdh的基因序列，設計合成3對特異性引物，通過優(yōu)化多重PCR體系，建立豬鏈球菌3種主要毒力因子的快速檢測方法，并用此多重PCR方法對16株毒力因子背景情況清楚的豬鏈球菌菌株(包括10株SS2，3株SS1、1株SS7、2株SS9)進行檢測，結果與已

4、知背景情況相符合，表明此方法檢測的結果具有較高的準確性。結果表明建立的多重PCR方法具有特異性高、敏感性好、重復性高，操作簡單、節(jié)約時間和低成本等特點。為該病快速診斷和對豬鏈球菌毒力因子的分子流行病調查提供新的檢測方法。 利用建立的豬鏈球菌3種主要毒力因子多重PCR方法檢測了273株致病性豬鏈球菌菌株，以分析其三種重要毒力因子的分布。結果表明gapdh、epf和sly在致病性豬鏈球菌中檢出率比較高，檢出率分別為36.2％(99/